如何快速启动siRNA文库筛选
转自：优宁维抗体专家
但我们实验室没有高通量仪器，也能做siRNA文库筛选吗？
当然，小几十个基因的筛选排枪就能搞定
但我之前没操作过，有点方
不方，基本操作和单基因一致，只不过通常是用96孔细胞板进行
那我可以试试看
对了，你讲座中说的基因家族分类亚库和我想要的不太匹配呢
你说的是这些亚库嘛？
问题不大，图中所有文库的基因列表我都有，你可以挑选喜欢的基因定制，毕竟只要有5个基因就能定制文库了，价格很划算
能定制还蛮不错的，那我来看看能不能凑些基因出来给你
但是定制的规格、产品形式又是什么样的？
定制会更灵活：规格上有0.1nmol、0.25nmol、0.5nmol、1nmol和2nmol5种可选，siRNA你可以选择4条分装的，也可以选择SMARTpool形式的
等等等，什么叫SMARTpool？
哈哈，讲座没认真听吧。每个基因会提供4条不同的siRNA，SMARTpool就是把4条siRNA预混后共同放在1个孔里
那我要怎么选啊？
做多个基因筛选的话，我更建议选SMARTpool，这样你的转染工作量就减少了3/4，而且SMARTpool沉默效果更好，毕竟4条不同的siRNA共同发挥作用
那沉默效率怎样？
所有的siRNA出厂前都有做过验证，而且是有沉默效率保障的，保证每个基因对应的4条siRNA中至少有3条在mRNA水平上有≥75%的沉默效率
OKK，那这个规格我咋选呢？
如果只是利用文库做一下基因的初筛，那0.1nmol绝对够用了。常规筛选剂量下，0.1nmol可以支持10次左右的筛选
这样啊，那0.1nmol确实够用了，筛到以后，我再单独购买大规格的siRNA就是了
对的，就是这个意思
行，那我了解了，你把泛素化集合相关的基因列表发我，我看看选一些，再把我手头上有的基因列一列，到时发你
好哒，这是基因列表，请查收