我国学者研究证实，免疫组化检测BRAF突变的一致性高达99% | WCLC 2023
转自：医学界
检测成本低、周期短、结果可靠，免疫组化助力筛选双靶联合方案有效患者！
BRAFV600突变是近年来非小细胞肺癌（NSCLC）中备受关注的少见驱动基因变异之一，既往研究报告的突变频率约为2%-4%[1]，但由于我国肺癌患者基数较大，每年新发病例超过80万例，携带BRAFV600突变的患者仍为数众多。且既往研究显示，BRAFV600突变与患者无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）较差有关[2]，传统化疗和免疫治疗疗效不佳，因此患者预后一度相对较差，特别是疾病处于晚期阶段的患者。
所幸，达拉非尼+曲美替尼的双靶联合方案，已凭借出色的疗效和安全性在我国获批上市并被纳入医保，成功打破了既往BRAFV600突变精准治疗领域的空白，这也使临床实践中检测BRAFV600突变患者的重要性大幅提升。从靶点检测的角度来看，目前相关指南和共识推荐的首选检测方法是逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及二代测序（NGS）法，但上述方法也存在检测周期较长、检测成本较高、可及性相对有限等问题。
免疫组化（IHC）则同样是NSCLC诊断过程中常规应用的检测方法，且具有检测结果回报快、成本低的优势，在大多数医院和检测机构均可开展，美国国立癌症综合网络（NCCN）NSCLC临床实践指南指出，IHC法可用于检测BRAFV600E突变的状态，但需经过实验室验证后方可广泛开展。然而，目前国内尚缺乏NSCLC中IHC检测BRAFV600E与分子检测的一致性验证数据及判读标准。
在2023年世界肺癌大会（WCLC）上，我国专家汇报了一项来自我国的多中心、回顾性研究结果（摘要号：EP06.03-21）[3]，该研究显示使用特异性识别BRAFV600E突变蛋白的VE1抗体，可使IHC法检测与RT-PCR/NGS法检测BRAFV600E突变的一致性高达99.2%，支持IHC法用于BRAFV600E突变的初筛。
纳入国内数百例患者，
评估免疫组化检测BRAF的可行性
此次研究共纳入2017-2022年间我国6个癌症中心已知BRAFV600E突变状态的493例NSCLC患者，其中肺腺癌占91.9%，92.5%的固定石蜡包埋（FFPE）组织样本从原发灶获取，82.4%（407例）为手术切除样本，17.6%（86例）为活检样本，BRAFV600E突变状态由RT-PCR法（310例，62.9%）或NGS法（183例，37.1%）确定。
使用VE1抗体对FFPE组织样本进行的IHC法检测（简称VE1IHC法），分别由2位病理科人员独立完成，根据着色强度（癌细胞胞浆着色，见图1）判读BRAFV600E突变阳性或阴性，以及非特异性背景着色情况；如2名病理科人员判读结果不一，则用多头显微镜再行评估。
VE1 IHC法与分子检测一致性>99%，
可准确识别BRAFV600E突变
在研究纳入的141例BRAFV600E突变阳性肿瘤中，VE1IHC法报告了137例突变阳性及4例突变阴性病例；对352例BRAFV600E突变阴性肿瘤，VE1IHC法报告结果均为阴性，因此VE1IHC法检测的整体敏感性、特异性、一致性、阳性预测值和阴性预测值分别为97.2%、100%、99.2%、100%和98.9%（详见表1）。
表1.VE1IHC法检测与分子检测手段结果的一致性数据
VE1IHC法报告的检测结果，整体与RT-PCR法结果的一致性较NGS法更高；按照样本类型划分时，VE1IHC法对手术切除来源组织样本的检测结果，与分子检测方法的一致性可达到100%（详见图2）。
精准治疗，检测先行，
IHC法初筛具有多重优势
从本次回顾性、多中心研究来看，VE1IHC法检测NSCLC中BRAFV600E突变的结果，与RT-PCR/NGS两种常用的分子检测高度一致，这也与既往结直肠癌、甲状腺癌和黑色素瘤中的同类研究结论相似：VE1IHC与分子检测的一致性高达99%[4]，可作为BRAFV600E突变的常规筛查方法。
免疫组化检测的便捷性有望让BRAF基因检测得到更好的普及，指导靶向治疗用药。对于该靶点，达拉非尼+曲美替尼方案已获国内权威指南推荐，用于BRAFV600突变晚期NSCLC一线治疗。在临床II期研究（BRF113928）中，达拉非尼+曲美替尼方案一线治疗的客观缓解率（ORR）达到63.9%，患者中位PFS超过10个月，中位OS为17.3个月，5年生存率也达到22%[4]，因此尽早基于IHC法阳性结果，为BRAFV600突变患者选用达拉非尼+曲美替尼方案，无疑对改善患者预后至关重要。
此外，与RT-PCR、NGS两种检测方法相比，IHC法对检测条件和组织取样量的要求较低、检测结果易于判读，兼具成本低和速度快两大优势，或更适合用于BRAFV600E突变的初筛。不过本次回顾性分析也显示，VE1IHC法检测存在少数假阴性结果，因此在实践中应考虑充分取样，以多种检测手段/多个平台对初筛结果进行验证，也期待后续能够有前瞻性研究结果，进一步支持VE1IHC法指导BRAFV600E突变阳性NSCLC患者的临床精准治疗。
参考文献：
[1]TanI,StinchcombeTE,ReadyNE,etal.Therapeuticoutcomesinnon-smallcelllungcancerwithBRAFmutations:asingleinstitution,retrospectivecohortstudy[J].TranslationalLungCancerResearch,2019,8(3):258-267.
[2]YanN,GuoS,ZhangH,etal.BRAF-mutatednon-smallcelllungcancer:Currenttreatmentstatusandfutureperspective[J].FrontiersinOncology,2022,12:863043.
[3]YuanP,etal.EP06.03-21UsefulnessofImmunohistochemistryfortheDetectionofBRAFV600EinLungCancer:AMulticenterRetrospectiveStudyinChina.WCLC2023.
[4]PlanchardD,BesseB,GroenHJM,etal.Phase2studyofdabrafenibplustrametinibinpatientswithBRAFV600E-mutantmetastaticNSCLC:updated5-yearsurvivalratesandgenomicanalysis[J].JournalofThoracicOncology,2022,17(1):103-115.
审批码TML0009868-32597有效期至2024-09-14，资料过期，视同作废