抗原-生物素化抗体-亲和素-酶标生物素复合物组成、工作原理
亲和素通过生物素与抗体结合形成稳定的复合物。酶标生物素结合将酶标生物素加入到反应体系中。酶标生物素能够通过与亲和素的结合进一步结合到抗原-生物素化抗体-亲和素复合物上。底物反应添加适当的底物(通常是酶底物溶液),酶标生物素会催化底物反应,产生可检测的信号(如颜色变化或荧光信号)。检测和分析使用...
...Infect | 复旦大学李继喜团队解析猴痘病毒RNMT酶复合物发挥...
基于此,研究团队解析了猴痘病毒来源mRNA(鸟嘌呤-N7)甲基转移酶大小亚基结构及结合底物S-腺苷甲硫氨酸的复合物结构,并结合SAXS、ITC、SPR和定点突变的实验结果,发现了猴痘病毒mRNA(鸟嘌呤-N7)甲基转移酶底物结合的独特方式和关键氨基酸,以及mRNA(鸟嘌呤-N7)甲基转移酶大小亚基结合过程中的构象变化。这些工作为研究猴...
中国科大张凯铭团队解析人源m6A甲基化酶复合物冷冻电镜结构
再通过调低冷冻电镜密度阈值,借助已解析的METTL3/14核心晶体结构和锌指溶液结构1-4,搭建出了MAC-MACOM复合物中两个亚基的相对空间关系(图3b,同时通过分析s4U标记的RNA底物与MAC-MACOM复合物的交联质谱结果,确定了RNA底物在MAC-MACOM复合物上的结合区域,提出了可能的m6A甲基化酶复合物修饰RNA底物的作用模型(图3c)。
研究揭示糖基磷脂酰肌醇转酰胺酶复合物与配体结合的结构和自抑制...
这种多重保护机制避免了因底物宽泛性而造成的意外水解。????研究显示,底物结合GPI-T时,信号肽与复合体的结合提供结合能,促使GPI-T亚基以刚性移动为主的构象变化,启动上述耗能的激活过程,打开自抑制环;同时,信号肽近催化部位的亲水部分通过诱导契合的方式,促使GPI-T催化中心的精确重构(图2d)。????进一步,...
Science丨施一公/周瑞团队揭示γ-分泌酶识别并切割底物的分子机制
由于酶与底物的结合-酶切-解离的过程极其动态,获得酶与底物的复合物结构难度非常大,作者引入了两个策略:1.经过大量筛选,分别在底物近膜区和酶NCT亚基上引入半胱氨酸突变,通过二硫键交联稳定复合物;2.将酶催化残基之一385位天冬氨酸(Asp385)突变为天冬酰胺(Asn),既防止底物的切割,又可以模拟催化水解的中间状态。
光酶催化领域迎重要成果:科学家研发光酶协调催化策略,两步反应...
然而,此类反应都需要采用亲电自由基前体,并通过单电子还原机制来生成自由基,而且大多依赖于酶与底物生成电子给体-受体复合物的反应,这就导致底物范围比较受限(www.e993.com)2024年8月31日。据了解,利用氧化机理可以生成自由基,从而能够极大地丰富自由基前体的官能团类别(比如胺和羧酸)等。但是,由于通过氧化氨基酸侧链,可以猝灭黄素的激发态,导致这...
【科技自立自强】西安交大科研人员在生物酶多构象催化领域取得...
酶在所有生物体中普遍存在,行使细胞内催化化学反应的功能。生物酶作为结构支架,能够高效、特异地识别和结合其底物,酶-底物复合物在维持细胞基本活动中发挥着关键作用。一方面,精确催化要求酶与底物识别的唯一性,而另一方面,生物复杂环境的客观性又使得生物酶催化呈现出多样性,这种底物唯一性与大分子构型多样性的和谐统一...
施一公,发论文!|蛋白|细胞|底物|前体|反恐|复合物|化学家|特种...
冷冻电子显微镜显示,在过渡状态下,底物模拟物捕获了γ-分泌酶,这种结构与分子动力学模拟捕获的活化酶-底物复合物一致。在硅模拟和在纤维素荧光显微镜支持稳定酶-底物复合物的FAD突变。秀丽隐杆线虫中C99和/或早老素-1的神经元表达仅在FAD突变的转基因中导致突触丢失。设计的稳定酶-底物复合物和阻断Aβ产生的突变...
“食油”酶复合物结构破解,为研发生物工程催化剂打开大门
“食油”酶复合物结构:跨膜双蛋白复合物(左)的高分辨率冷冻电镜图使研究人员能够确定构成这两种蛋白质的单个氨基酸的位置(右)。AlkG(灰色)充当电子载体,将电子从其单个铁原子(红色球体)传输到AlkB酶活性位点(彩带结构)的两个铁原子(红色球体)。活性位点下方的洋红色结构是基底(见特写视图)。图片来源:...
...| 张刚课题组发现蛋白磷酸酶与激酶在Bub1/BubR1复合物中空间...
没有结合微管的着丝粒能够激活该信号通路,产生有丝分裂检查点复合物(mitoticcheckpointcomplex)来抑制E3泛素连接酶APC/C,使其无法降解cyclinB,从而维持cdk1的高活性,保证细胞处于有丝分裂状态。当所有的染色体着丝粒都与微管建立了稳定的结合后,着丝粒不再激活检查点,已有的检查点复合物也被解聚,APC/C恢复活性...