A260 /A280,A260 /A230 看不懂的进!
A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物、盐(胍盐)等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。如果样品的A260/280=1.7,A260/230=0.5,那么就应该考虑污染原因不是胍盐残留,而是蛋白残留。如果样品的A260/280=1~1.5,260/230=1~1.5,那么污染原因就应该考虑是酚残留。如果RNA样品的A260/2...
看完师姐的 PCR 笔记,260/280 终于整明白了...
通常,在260,280,230nm处分别测定其吸光度(A260、A280、A230)并计算其比值(A260/A280,A260/A230)。230/260/280究竟有何意义?A260为核酸的吸光度,A280为蛋白质的吸光度,A230为其他杂质(多糖等)的吸光度。纯DNA的A260/A280为1.8,纯RNA的A260/A280为2.0。如果OD比值不...
蛋白质特性与分离纯化技术的选择
螯合物的稳定性受单个组氨酸和半胱氨酸解离常数所控制,从而亦受流动相的pH和温度的影响,控制条件可以使不同蛋白质相互分离。(2)小配体亲和介质配体有精氨酸、苯甲酰胺、钙调因子、明胶、肝素和赖氨酸等等。(3)抗体亲和介质即免疫亲和层析,配体有重组蛋白A和重组蛋白G,但蛋白A比蛋白G专一,蛋白G能...
常见溶剂中哪种才是最适宜的核酸稀释液?
DNA中嘌呤及嘧啶环的共轭双键均具有吸收紫外线的性质,最大吸收峰在260nm波长处,碳水化合物的最大吸收峰在230nm左右,蛋白质的最大吸收峰在280nm左右,因此使用A260/A280和A260/A230两个比值可以反映核酸的纯度。A260/A280比值大于1.8表示样品DNA纯净,反之则存在蛋白质的污染,本次实验发现三种稀释液对核酸的A260/...
核酸的鉴定、保存与应用
蛋白质的紫外吸收峰在280nm与酚在270nm的高吸收峰可以鉴别主要是蛋白质的污染还是酚的污染。RNA的污染可致DNA制品的比值高于1.8,故比值为1.8的DNA溶液不一定为纯的DNA溶液,可能兼有蛋白质、酚与RNA的污染,需结合其它方法加以鉴定。A260/A280的比值是衡量蛋白质污染程度的一个良好指标,2.0是高质量RNA的标志。但要...