知识分享|一文了解实时荧光定量PCR(qPCR)技术的原理与分类
4.常见分类目前,根据所用荧光物质的化学原理和PCR检测的特异性,可将qPCR其分为两大类:第一类:DNA染料法荧光染料可以快速渗入DNA双链与之结合,发射荧光信号,而不掺入双链的荧光染料分子不会发射任何荧光信号,可以对特异性和非特异性的PCR扩增产物进行检测,例如SYBRGreenI和EvaGreen。DNA染料法第二类:...
过年亲手放过的烟花,在师妹的 qPCR 扩增曲线上复现了
1、当面对qPCR扩增曲线异常时,如何应对?正常的qPCR扩增曲线应为S型,理想的CT值范围在20~30。若出现CT值偏大、无平台期或平台期下降等异常情况,可尝试以下调整:●若CT值偏大,可能是模板量不足或基因表达丰度低,建议增加模板量并观察CT值是否按预期倍数减少。●考虑qPCR反应条件或...
qPCR 曲线「丑」到拿不出手!除了引物,这些问题也要注意
Ct值过低:可能是模板浓度高,引物设计不合适。因此应减少模板量或稀释cDNA,优化程序避免非特异性扩增。CT值重复性差:仪器、试剂、耗材、实验操作细节等众多因素,具体问题具体分析。3.qPCR扩增曲线异常:正常扩增曲线应呈平滑S型。常见异常包括扩增曲线锯齿状(RNA浓度低或体系含有杂质);无法到达平台期(...
将细如发丝的0.01mm铜线嵌入2μm厚的平面振膜!疯狂的1板2圈耳机
频响曲线:“白虎”与“海螺”的轮廓近似,低频都有稍多的隆起,且3kHz、5kHz和9kHz这三个频点都有较高的增益。但差异最明显的还是低音,新品“白虎”进一步扩增了低音的范围和氛围,这使得它的下潜和轰鸣感要大于“海螺”许多(似乎超越了哈曼2019)。不过,受益于较强势的高频能量,其低音的实际听感并不至于夸张到“...
圣湘生物2024年半年度董事会经营评述
按照检验原理和方法分类,体外诊断可以分为生化诊断、免疫诊断、分子诊断、微生物诊断、血液诊断、POCT(即时诊断)等。据柳叶刀诊断委员会相关报道数据显示,全球仍有47%的人口有限或无法获得诊断常见疾病所必需的关键检测和服务,低收入和中低收入国家,有约81%的人口无法获得最简单的诊断检测。在此现状下,高品质的人人...
中指研究院:物业服务是“增量+存量”市场逻辑 预计2025年全国物业...
(一)规模业绩:营收与利润增速双降,“增收不增利”现象仍在持续1.A股物企营收均值同比增长12.37%,毛利润均值同比增长1.44%2024年一季度,5家A股物企营业收入均值为11.45亿元,同比增长12.37%(www.e993.com)2024年10月23日。保持营收正增长的企业有4家,其中招商积余的营业收入最高,约为37.05亿元,新大正的营收增速最快,约为19.51%。
揭开“内标”未出之谜
这次有新的发现,这两个样本内标有原始荧光曲线,只是荧光强度不高(图3),查看其它样本内标荧光扩增曲线(图4),发现该批样本从整体上看,内标荧光强度均不高,这与试剂中加入内标浓度低有关,其中未检出Ct和扩增曲线样本的内标荧光强度最低(图4箭头所指),由此可见,仪器该孔捕捉荧光信号正常,因此,也排除了仪器孔荧光...
国家药监局:血液病流式细胞学人工智能分析软件性能评价审评要点
提供原始数据库、基础数据库、标注数据库、扩增数据库(如有),关于疾病构成的数据分布情况,包括适用人群、数据来源机构、采集设备、样本类型等因素。若数据来自公开数据库,提供公开数据库的基本信息(如名称、创建者、数据总量等)和使用情况(如数据使用量、数据质量评估、数据分布等)。
大规模新冠核酸筛查中出现的异常扩增曲线分析
扩增曲线呈现为V型或是倒V形状,多见于PCR反应板四周边缘孔位。02原因分析:该类型曲线反应孔多数会出现液面偏低情况,甚至该孔无液体(上机前检查液面正常)。可能是PCR反应板封板膜未盖严,或加热变形,膜上翘导致液面蒸发。03解决方案:建议采用质量好、加热不易变形的封板膜;核酸加样后用力压实封好反应板...
如何解析新冠核酸检测中的异常扩增曲线?
3.扩增曲线末尾起跳打开网易新闻查看精彩图片原因分析:(1)阴性对照曲线末尾起跳,表示存在交叉污染。(2)复检样本,排除非特异性扩增的可能性。(3)正常样本曲线末尾起跳,怀疑模板存在交叉污染;或者样本浓度低、加样量不准确导致扩增效率低。(4)所用的试剂设计不合理,或存在交叉污染,或操作环境中有气溶胶造...