...棘孢木霉天冬氨酸蛋白酶基因的克隆表达及其对大豆分离蛋白的水解

PCR产物经纯化后连接至pEASY-Blunt载体上,转化至大肠杆菌DH5α菌株中,挑取阳性克隆子进行测序。测序结果表明,克隆的asp基因具有完整的开放阅读框,长度为1359bp,编码453个氨基酸。其DNA序列与数据库公布的序列存在27个碱基突变,相似性为98.01%;推测编码的氨基酸序列存在3个氨基酸残基突变,分别为D251G、S289A和N397D。

粉丝福利!「BioONE 2024」初版议程大揭秘,转发参与赢好礼

Topic:不同表达系统表达纳米抗体的比较研究龚睿中国科学院武汉病毒研究所抗体工程学科组长09:30-10:00Topic:ADC产品的FDA法规监管考量孙丁禾埃立康生物制品高级顾问10:00-10:30Topic:NMPA,FDA,EMA现场审计关注点(拟)包财百奥泰质量管理高级副总裁10:30-11:00茶歇11:00-11:30Topic:...

疫苗周刊:艾滋病疫苗临床落空;新型疫苗研发蓬勃发展;百克跻身百亿...

差异可能因免疫系统状态不同。因素如年龄、带状疱疹再激活、免疫介导炎症性疾病诊断和伴随治疗可能影响免疫反应,但因样本量小,尚无定论。所有最初抗体水平阴性的患者,在接种疫苗后抗体滴度达到阳性。大多数患者对RZV疫苗耐受良好,仅少数出现轻微或严重不良反应。内容来源:药时空??有效志贺氏菌(痢疾)疫苗的潜在经济...

我科研人员开发新型实用分子克隆技术,系统表达载体开放共享

基因加带通用接头序列后可克隆到系统任何一个载体,形成一个标准化的克隆系统。如有不使用通用接头序列的无缝克隆要求,只需将目标基因与载体的重叠序列设计在通用接头的外围,通用接头可在克隆反应中消除,在不改变载体的情况下实现无缝克隆。为了方便NC克隆技术的推广使用,言普等还构建了一系列配套的系统表达载体,包括...

immunoPET与核素偶联抗体药物系列 | 探针载体

免疫PET成像的关键取决于成像示踪剂靶向肿瘤组织的特异性,肿瘤摄取时间,以及图像的肿瘤/本底对比度。为了获得高度特异性的肿瘤摄取和低背景保留,成像探针的载体通常是抗体、抗体片段、VHHs或多肽等分子。本期内容为大家介绍免疫PET成像中常用的探针载体。单克隆抗体...

PCR,酶切,质粒,载体构建,电泳:SnapGene 最全最详细使用教程

十、引物设计及模拟克隆以pEGFP-C1构建humanp53CDS过表达载体为例,通过酶切位点筛选,选择“EcoRI”和“BamHI”两种内切酶,其中需要注意的是:EcoRI在上游,BamHI在下游1.按照之前步骤,用snapgene打开p53CDS序列2.选择底部“Sequence”页面3.接下来进行引物设计:首先先选上游前20个碱基...

分子克隆技术全攻略

常含有目的基因,用体外重组方法将它们插入克隆载体,形成重组克隆载体,通过转化与转导的方式,引入适合的寄主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的基因的扩增。其主要目的就是大量扩增目的基因,为下一步的基因功能研究做准备。可以应用于蛋白表达、...

Nature争鸣| 裸鼹鼠抗癌能力之争:HRAS表达量可能是关键决定因素

通过使用慢病毒载体,英国团队共建立了从11只裸鼹鼠中5个不同器官(肠、肾、胰腺、肺和皮肤)中得到的不同细胞系。通过对这79个细胞系进行检测,英国团队发现同时表达SV40LT与HRASG12V的细胞会产生明显的肿瘤细胞克隆。进一步地,英国团队希望通过将SV40LT与HRASG12V的裸鼹鼠细胞转入免疫缺陷型小鼠中检测这些细胞的致...

基因过表达|AAV定制服务

#什么是基因过表达?基因过表达(geneoverexpression)是将目的基因CDS克隆到相应的质粒或病毒载体上,利用载体骨架上构建的调控元件,使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现目的基因的过表达。#基因过表达有哪些应用?研究基因功能药物靶点筛选...

猪伪狂犬病毒gB基因在大肠杆菌中的分段表达

将阳性质粒用EcoRI和SalI进行双酶切,回收gB各片段,连接至经同样双酶切的原核表达载体pGEX-6P-1中,构建原核重组表达质粒pGEX-6pgB-1、pGEX-6p-gB-3\pGEX-6p-gB-4和pGEX-6p-gB-5。转化至BL21感受态细胞。筛选阳性克隆,提取质粒,用EcoRI和SalI酶切鉴定,鉴定正确的阳性质粒送上海英骏生物技术有限公司测序。