实验室常见有毒试剂有哪些?注意事项及应采取防护措施
1-3RNA提取及PCR等实验:苯、二甲苯、酚、trizol、氯仿等有机溶剂可致癌,DEPC(焦炭酸二乙酯)用于溶解RNA,潜在的蛋白质变质剂。1-4蛋白电泳:PMSF用于蛋白提取,高强度毒性;SDS(十二烷基硫酸钠)用于SDS-PAGE电泳凝胶配置,有刺激作用,可引起呼吸系统过敏性反应;丙烯酰胺(未聚合)蛋白电泳凝胶原料,潜在神经毒性;TEMED(...
细菌DNA的提取方法
12.弃上清,70%乙醇洗,也可以再用100%乙醇洗,然后溶解于100ml水中。方法(二)1.将菌株接种于液体LB培养基,37℃震荡培养过夜。2.取1.5ml培养物12000rpm离心2min。3.沉淀物加入567ul的TE缓冲液,反复吹打使之重新悬浮,加入30ul10%SDS和15ul的蛋白酶K,混匀,于37℃温育1h。上海创赛提供十二烷基...
RNA的提取与提纯
将最后的沉淀溶解于DEPC水中,一般加入30~100μL的DEPC水,可用枪头吹打,促进RNA的溶解,完成整个RNA的提取。最后可将样品保存在-20℃或-80℃。
植物基因组DNA及总RNA提取技术
提取DNA所用的提取液、吸头、离心管等需要高压灭菌以灭活DNase。RNase存在于所有的生物中,并且耐沸腾、蒸煮,所以在提取RNA的过程中要防止RNA酶污染,用具如吸头、离心管、水、药品等都要经RNase的抑制剂DEPC处理,即每100mL溶液中加入0.1~0.2mLDEPC溶液,37℃过夜,然后高压灭菌20min以灭活DEPC。由于RNA容易降解,...
细胞转染的知识点整合,含细胞转染具体实验步骤视频
siRNA溶解021、将装有siRNA的离心管短暂离心(2000转速即可),确保siRNA位于离心管底部。2、根据下表推荐的DEPC-DW(orRNase-freewater)使用量对siRNA进行溶解,DEPC水随siRNA免费提供。3、使用移液器上下吹打3-5次(或短暂的涡旋震荡)。
中华人民共和国农业农村部公告第253号
2.3.3.2菌液浓缩将灭活菌液用连续离心机离心浓缩(转速16000r/min,进料速度1000ml/min)或用0.22μm中空纤维过滤器进行浓缩,浓缩菌液用pH值7.20.01mol/LPBS重悬制备菌悬液,使最终菌悬液含菌数应≥6.0×109CFU/ml(www.e993.com)2024年9月30日。2.4疫苗制备2.4.1水相制备取灭活的副鸡禽杆菌YT株和JN株菌悬液,根据其含菌数与...
核酸知识系列(三)|RNA|DNA|盐酸胍|核酸|乙醇|浓度|-健康界
TRIzol法是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂,在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性,氯仿离心,异丙醇沉淀RNA。苯酚法,将细胞置于十二烷基磺酸钠(SDS)的缓冲液中,加等体积水饱和酚,剧烈震荡,离心形成上层水相和下层酚相,核酸溶于水相。异硫氰酸胍-酚法:用过异硫氰酸胍与β-疏基乙醇共同作用抑制RNase的活性。异...
实验总失败?问题可能出在这个基础环节
所以,在DNA提取过程中使用的缓冲液务必要保证无核酸酶。目前缓冲液除去核酸酶采用的方法有高压灭菌以及DEPC处理。但是经过DEPC处理虽然可以使核酸酶灭活,却会对水质产生影响,使得水的pH和有机物含量发生了变化,改变了DNA的保存环境,进而会破坏其结构。因此,为保证结果的准确性,使用超纯水配置缓冲液是个...