【聚焦】荧光素酶可催化荧光素发光 萤火虫荧光素酶最具代表性

荧光素酶报告系统分为单荧光素酶检测系统、双荧光素酶检测系统,单荧光素酶检测系统可检测萤火虫荧光素酶,双荧光素酶检测系统可检测萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶。全球范围内,萤光素酶检测系统相关企业有PromegaCorporation、Biotium、ActiveMotif、PerkinElmer等。萤火虫荧光素酶是从萤火虫中分离得到的单体酶,分子量为...

蛋白-DNA互作三驾马车之双荧光素酶报告基因实验

(7)注射后荧光素酶检测试剂盒(Dual-LuciferaseAssaySystem,Promega公司)(具体步骤详见说明书)在promega发光检测仪(PromegaGlomax2020)分析荧光素酶活性。(8)根据双报告系统测得的荧光值,算出目的基因质粒的荧光值/内参质粒荧光值(即F/R值),并算出相对于对照组的比值,求出标准误,作出直方图。

研究进展|田克恭团队建立了新方法:Crispr-Cas13a可视化检测猪繁殖...

3.4增强Cas13a荧光检测在临床样本中的应用为了验证增强型Cas13a荧光荧光检测技术在临床样品中的应用,采用增强型Cas13a荧光荧光检测技术和RT-qPCR技术从不同农场采集了37份组织样品。32例组织标本为PRRSV阳性,5例为Cas13a荧光增强检测阳性。RT-qPCR是根据制造商的使用手册通用RT-qPCR试剂盒(Anheal)进行的。

【前沿科普】Nanoluc帮你“沙里淘金”——PROTAC库的筛选

基于以上设想,我们拟建立一个利用Nanoluc??荧光素酶的PROTAC筛选平台。但由于Nanoluc??荧光素酶的活性依赖于HiBiT融合蛋白与LgBiT的组装效率,如果采用瞬时转染的方法,质粒的质量、转染条件(转染比例和转染试剂)、实验批次都会影响细胞内Nanoluc??荧光素酶的活性,进而对筛选平台的建立及后续的筛选产生很大的影响。为...

MDM2抑制剂RG-7388诱导弥漫性大B淋巴瘤细胞凋亡和周期阻滞

ClickiTplusEdU试剂盒购自美国ThermoFisher公司。AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒购自中国索莱宝(Solarbio)公司。Caspase-Glo??3/7酶活检测试剂盒购自Promega(北京)生物公司。抗体MDM2、p53、p27、p21、cdc25C、CDK6、cdc2、CyclinB1、PARP、Mcl-1、Bcl-xL、Vinculin购自美国CST公司,GAPDH购自中国武汉三鹰...

康为世纪2022年年度董事会经营评述

公司创始人王春香博士是国内核酸提取行业的开创者之一,公司及王春香博士作为主要起草人制定了GB/T37875-2019《核酸提取纯化试剂盒质量评价技术规范》,建立了行业准入标准(www.e993.com)2024年11月7日。4)分子诊断试剂盒依托高性能的分子检测酶原料,公司于2019年开始布局分子诊断试剂盒业务。公司创始人王春香博士是《核酸检测试剂盒质量评价技术规范...

一种具有降低血栓形成性、细胞增殖和蛋白质吸附性的润滑性配方

然而，我们确实在播种后5-8小时的显微镜下检查了表面。用分子探针（Eugene，OR）的活/死活生存能力染色试剂盒对细胞进行染色后，也拍摄了荧光照片。通过这种实验，由于钙黄绿素在细胞内的保留，活细胞呈绿色。由于核酸的溴化乙锭染色，死亡细胞呈红色。所有的照片都代表了所分析的整个表面积。6、使用聚氨酯管进行的全血...

新工具“照亮”蛋白质之间的相互作用,解析四种不同的观察方法

Zieba-Wicher说:“不需要特定的抗体,就可以检测到特定的磷酸化。”“磷抗体的质量并不总是最好的。有很多交叉反应。但这种方法可以用于任何目标,只要存在针对总蛋白的抗体。”基于荧光素酶的检测使动态相互作用的研究成为可能2012年,Promega推出了NanoLuc,其从虾中提取19kd荧光素酶,经过改造后,发光亮度...

报告基因(report gene)的应用

二:试剂:荧光素酶分析系统试剂盒PBS缓冲液(不含Mg2+Ca2+)荧光素酶分析底物荧光素酶分析缓冲液5×细胞培养裂解液三:操作:1.加4倍体积的水于1体积的5×细胞裂解液试剂中,使最终浓度成为1×,平衡1×试剂并使荧光素酶分析试剂至室温。2.去除培养基,并用PBS缓冲液仔细洗涤细胞两次,不能丢失细胞。

特邀专家方法 | 植物转录因子与DNA互作研究详细技术方案

(3)双荧光素酶活性检测。采用Dual-LuciferaseReporterAssaySystem试剂盒(Promega,CatNo.E1910)进行测定。具体操作方法如下。将转化的原生质体200×g离心2分钟,去除上清。加入80μL1×PassiveLysisBuffer,旋涡振荡混匀,冰上静置;将底物I(LuciferaseAssayReagentII,LARII)以每管15μ...