《食品科学》:中国检验检疫科学研究院陈颖研究员等:转基因大豆低...
即95%置信区间下,当模板添加量为1000ng时,LLP转基因大豆GTS-4-3-2的realtimePCR定性检测限为0.01%,低于其他报道中的realtimePCR检测方法。表明即使扩增体系中DNA模板含量高达,PCR也未受抑制。2数字PCR的定性检测限和定量检测限分别对含0.1%、0.05%、0.01%、0.005%和0.001%转基因大豆GTS-4-3-2的样品...
一文读懂:PCR,qPCR,Real-time PCR,RT-PCR和RT-qPCR
实时荧光定量PCR(Real-timePCR,QuantitativeReal-timePCR,qPCR),即第二代PCR技术,是指在整个扩增的过程中,引入了荧光染料或者荧光基团,随着DNA数量的成倍增加,反应体系中的荧光信号也会增强。在整个PCR反应过程中,借助对荧光信号的强弱进行检测实时监测每一个循环中扩增产物量的变化,最后通过标准曲线和CT值对待...
创·问|新羿生物:数字PCR的春天已经来临
A:数字PCR被称为第三代PCR,是一种基于PCR技术的高灵敏度、高特异性的核酸定量检测方法。它适用于痕量核酸样本的检测,如基因突变、病毒载量、基因表达等研究。应用场景包括生命科学研究、临床诊断、食品安全等领域。数字PCR技术流程数字PCR的原理,就是把一份反应液样本,分散成几万个极微小的液滴,每个小液滴所...
最熟悉的陌生人 | 高通量PCR,不一样的PCR(一)
高通量PCR可以解决dPCR检测通量低的问题为了解决dPCR信息通量低的问题,普济生物创新研发了“高通量PCR”技术平台,相对于传统PCR技术,高通量PCR在dPCR高灵敏度核酸定量检测的基础上,单管可同时检测上万重靶点。高通量PCR技术首先在实验流技术上解决了特异性的问题(特殊设计的引物避免非特异性扩增),其次在数据分析上...
综述| NAT REV MICROBIOL:微生物群落中的水平基因转移分析
这篇综述中提到的方法都是普遍适用的,只需要针对不同的微生物群落特征进行微调,比如,它们是否被稀释,是否存在重颗粒物,是否存在难以裂解的革兰阳性物种,是否存在PCR反应的抑制剂等。不同环境的MGEs具有不同的GC含量百分比、k-mer组成和基因内容。例如,与携带抗生素抗性基因的质粒相比,携带杀虫剂抗性或金属抗性基因的...
三阴性乳腺癌通过基因检测等进行分子分类以改善患者治疗
LAR和BL1亚型的中位OS最高,尽管LAR组的pCR率较低(www.e993.com)2024年7月30日。体外随访对具有代表性的三阴性乳腺癌亚型细胞系的研究表明,药物敏感性不同,如果得到验证,可能具有临床相关意义。值得注意的是,与基因表达定义的三阴性乳腺癌相反,在对IHC识别的三阴性乳腺癌的5个数据集的独立分析中未检测到所有七个集群。
那么问题来了,qPCR又是什么?
概念:常用于精确计算初始模板中目的基因的浓度,比如测定口腔拭子中的病毒颗粒数,细胞中的某基因浓度,得到的是单个样本定量的数据。其主要是指在荧光定量PCR中,对已知量的样本进行连续稀释后扩增,生成标准曲线。(1)将标准品稀释成不同浓度,作为模板进行PCR反应。
E.coli残留RNA检测Kit,严格监测质粒DNA纯度
质粒DNA做为细胞治疗和基因治疗药物的中间品或终产品,其中RNA片段的残留可能会降低DNA产品纯度,还可能会对其品质和安全性等产生一定的干扰,因此需对质粒DNA样本中宿主菌残留RNA的含量加以限制。采用经验证的发酵和纯化工艺虽然可以去除一部分宿主细胞RNA(HCR)等残留杂质成分,但产品中仍然可能会有HCR残留。为保障...
师弟的实验日记点赞 500+,戳到了多少 qPCR 实验人的痛处
调整退火温度:找到最适合的反应温度,高效率的PCR反应对于生成可靠的标准曲线至关重要。优质的qPCR仪器能够提供更加精确的温度控制及更高效的荧光检测,这有助于实现更高的扩增效率,从而产生更稳定和可重复的标准曲线,对于准确定量模板DNA浓度和评估基因表达水平非常关键。
综述| 基于血液样本的转录标识物在结核病诊断中的研究进展
由Sweeney等基于10个国家或地区、14个公开的RNA-seq和微阵列数据集分析得到的、整合GBP5、DUSP3和KLF2等3个基因表达水平的转录标识物是目前唯一已经商品化的检测试剂盒(Xpert-MTB-HR-Prototype),该试剂盒在多项前瞻性队列研究中达到了WHO设定的最低筛查标准。例如,一项纳入了南非、甘比亚、乌干达和越南疑似肺结核...