信得科技检测团队在中科院Top期刊《Poultry Science》上发表最新...
核酸提取及重组质粒的制备使用VNP-32P全自动核酸提取仪和诺维赞DNA/RNA提取试剂盒提取AIV、IBV、NDV、FAdV、ILTV、IBDV、CAV、MDV、MS、ORT和所有拭子样品的核酸。重组质粒pts-11和pnon-ts-11分别克隆有ts-11株和非ts-11株的potC部分基因,由宝生物工程(大连)有限公司合成。CycleaveqPCR反应程序Cycleaveq...
FSHW | 一种基于Dual-RPA的侧向流试纸条用于灵敏、现场检测转基因...
近年来,出现了RPA结合琼脂糖凝胶电泳(RPA-AGE)、实时荧光等策略RPA(RT-RPA)、RPA联合DNA荧光染料(RPA-SYBRGreenⅠ)、RPA联合侧向流免疫层析(RPA-LFD)和RPA联合Cas12a裂解系统(RPA-Cas12a-FS)已经在快速检测领域建立并实现。在这些方法中,试纸条法因其完全独立于检测设备,最适合现场检测。本研究通过对...
真的假的?构建质粒这些知道的越少,成功率越高
可能原因1:内切酶与底物DNA结合解决方法:降低使用的酶量;向上样缓冲液中加入SDS(0.1～0.5%)以分离酶与DNA。可能原因2:核酸酶污染解决方法:使用新配制的无污染的电泳缓冲液;使用新配制的琼脂糖凝胶;对DNA进行纯化。酶切不完全可能原因1:盐的抑制解决方法:在含有盐的缓冲液中活性低的酶,...
国自然撰写:经典分子机制研究(一)|位点|质粒|扩增|dna|rna|聚合酶...
接着用DNA回收试剂盒回收PCR所得扩增片段,用内部短引物鉴定PCR结果,电泳图显示这两对引物均扩增出位置正确的条带,_bp和_bp,提示扩增的1.8kbp的片段确实为基因B启动子。用DNA回收试剂盒回收PCR产物得基因B启动子(-1796bp到+37bp)扩增片段。2.1.2酶切PCR产物和pGL3-Basic质粒...
干货| 酶切实验切开 or 切不开,真的是玄学吗?
-酶与模板DNA结合-??部分限制性内切酶(如FokⅠ,TauⅠ)可能会与DNA结合,导致电泳时出现明显的凝胶迁移,使用含SDS的上样染料,加热使酶从切割的DNA上解离开。看完以上问题分析和经验分享,大家是不是对“玄学实验”多了一些信心呢?Vazyme提供SwiftCut快速限制性内切酶,5-15min准确完成DNA双链的切割,让分子...
E.coli残留RNA检测Kit,严格监测质粒DNA纯度
试行）中也明确指出需对生产工艺引入的工艺相关杂质，如宿主细胞RNA等纳入产品质量标准进行控制(www.e993.com)2024年11月8日。残留RNA检测方法已知，对于生物制品的起始原材料质粒DNA中的宿主菌RNA残留检测，通常采用20年版中国药典0541通则琼脂糖凝胶电泳法。此外，USP在今年4月发布了《mRNA疫苗质量分析方法-指南草案》...
质粒的提取和电泳检测
质粒的提取和电泳检测相关知识质粒(Plasmid):独立于染色体外的,能自主复制且稳定遗传的遗传因子。是一种环状的双链DNA分子。存在于细菌、放线菌、真菌以及一些动植物细胞中,在细菌细胞中最多。蓝白斑筛选:现在常用的质粒载体上都带有β-半乳糖激酶(LacZ)基因。载体上重组DNA的插入...
超螺旋质粒DNA纯化方案 (高质量高纯度质粒的制备)
质粒DNA基因治疗药物是以质粒DNA为载体的基因治疗产品，一般选择大肠杆菌作为宿主细胞，提取出的质粒中DNA会以多种形式出现：超螺旋质粒DNA(scDNA)、开环DNA(ocDNA)、线性DNA和质粒DNA聚集体等。另外，还伴随有宿主蛋白(HCP)、宿主核酸(HCD)、RNA、内毒素等杂质。其中超螺旋质粒DNA（scDNA）是我们的...
科研| Environ. Microbiol.:环境溶解DNA包含了微生物群落结构的...
3.微生物和病毒DNA提取:应用Mutluetal.(2008)描述的方案进行胞内DNA提取(iDNA),用341F和805R引物对两种iDNA的16SrRNA基因进行了部分扩增,产物用Qiime分析;使用Santos等人(2010)中描述方案提取病毒DNA(vDNA),通过脉冲场凝胶电泳检查vDNA的大小范围,使用古菌16SrRNA基因引物进行PCR检查,所有提取的DNA用Qubit...
《ACS AMI》上海交大朱新远:超分子嵌段聚合物载体进行可见光诱导...
由于该嵌段共聚物阳离子的特性,利用Zeta电位仪、原子力显微镜(AFM)以及琼脂糖凝胶电泳等检测手段深入研究了超分子嵌段共聚物的质粒DNA压缩能力。此外,这类嵌段共聚物超分子体系通过可见光源的照射,显著增强了其基因转染性能,尤其是在肿瘤细胞中体现了非常优越的基因治疗效果。因此该双重响应的超分子嵌段共聚物体系可以作为非...