...中国农业科学院张波研究员等:碱提酸沉参数影响大豆分离蛋白...

钠离子中和蛋白质颗粒表面电荷后,继续增加NaCl浓度,过量的钠离子会继续吸附到蛋白质颗粒表面,导致蛋白质表面净电荷增加,聚集程度下降。XuHuaneng等通过测定蛋白质Zeta电位和颗粒尺寸显示,10mg/mL的SPI溶液(pH6)在95℃加热30min,随后调整NaCl浓度从0mol/L到0.1mol/L,Zeta电位从-24.15mV下降到-4.97mV,...

2024重组胶原蛋白行业白皮书:从美业革新先锋到精准医疗动力源

美琉生物基于自研AIGC合成生物学模型,以胶原蛋白N端结构域表面电荷为主要参数,通过机器学习策略,优化了分泌信号肽和胶原蛋白的密码子,显著提升了细胞的合成效率。借此,重组胶原蛋白在毕赤酵母中的产量提高了4至9倍,并在保持高产量的同时,按药典标准将产品含量纯度提升至99%以上。美琉生物始终强调通过足量添加胶原蛋白...

CRISPR干预的CHO细胞系开发方法

在连续批培养中,这种基因的CRISPR-Cas9介导的KO完全消除了来自BCAA分解途径的抑制性副产物的产生,如异戊酸盐、异丁酸盐和2-甲基丁酸盐,从而导致细胞生长和生产力显著增强。2.2.信号通路工程通过表达BMP信号转导的关键元素的CHO细胞系(CHO-BMP-4)生产重组人骨形态发生蛋白-4(rhBMP-4)。这种细胞系经历了自分泌BMP...

纯化生物素修饰蛋白纯化、优势、应用

洗脱生物素化蛋白:使用含有生物素的洗脱缓冲液(通常为含有较高浓度生物素的缓冲液)或改变条件(如盐浓度、pH值等)洗脱生物素化蛋白,从亲和素或链霉亲和素柱中分离出来。后处理浓缩和进一步纯化:对洗脱下来的生物素化蛋白进行浓缩和进一步纯化(如透析、超滤等),以获得高纯度的目标蛋白。优势高特异性:生物素-...

CHO细胞表达系统与酵母细胞表达系统比较

可能在转录水平产生后生(Epigenetic)的调节,影响重组蛋白产率的提高;③转录提前终止,这主要是因为AT含量过多引起的.据报道HIV.1gpl20就是因为在AT丰富区因转录提前终止而不能在毕赤酵母中表达,在酿酒酵母中有一些共有序列,类似于HIV-1gpl20中引起转录提前终止的AT丰富区域,如:TTTTATA,当改变这些序列后,就可发现...

??研究蛋白质热稳定性的几种方法

比如做膜蛋白研究时,溶液环境中需要添加双亲性的分子,一端疏水一端亲水(www.e993.com)2024年11月15日。这种情况荧光分子会直接结合到疏水端,导致直接产生荧光信号。并且染料种类的选择、浓度的选择也很繁琐。外源荧光染料DSF也可能会产生背景荧光以及非特异吸附等假阳性结果。05内源差示扫描荧光法(inDSF)...

纯化大师班FAQ合集(内含讲座回放)

5月,纯化大师班系列讲座活动圆满结束,我们分别为大家带来了膜蛋白、结构生物学研究、分泌蛋白、天然蛋白和多糖纯化解决方案,从基础理论知识、纯化步骤、操作要点,到经典案例分享,进行了全方位解析。讲座结束后,还有很多小伙伴来问小优要讲座回放,这不立马就给大家安排上了,只要点击下方感兴趣的主题,即可观看回放!

HPV疫苗纯化工艺简析

图3.HPV疫苗纯化工艺离子交换层析:利用HPVL1蛋白在特定pH和盐浓度下的电荷特性,通过阳离子或阴离子交换层析可以实现进一步的纯化。例如,使用NanoGel-50SPHP阳离子交换介质具有高载量,同时该介质具有高耐盐性,支持在中等离子强度下大量捕获L1蛋白,有效去除杂蛋白;NWRosePlusQHP阴离子交换层析介质可用于精纯...

实用建议:如何合理设计稳定的冻干蛋白配方(二)

2.还应该研究其他能提高蛋白质稳定性的特异性配体(通过增加去折叠的自由能)。肝素和其他聚阴离子对生长因子的稳定性影响就是一个很好的例子。3.其它需要考虑的重要因素是离子强度对蛋白的去折叠和聚合的影响。须意识到,在预冻过程中,由于冰的形成将溶液浓缩,离子强度可增加50倍。因此负责原料药纯化和做药物配方前...

干货| 酶切实验切开 or 切不开,真的是玄学吗?

若使用传统限制酶,双/多酶切的条件不同,分别进行两次酶切,切完一个纯化后再切:温度要求不同,先酶切低温要求的,再酶切高温要求的;若盐浓度要求不同,先酶切低盐浓度要求的,再酶切高盐浓度要求的。诺唯赞SwiftCut快速限制性内切酶采用通用Buffer,单/双/多酶切均可使用同一管Buffer,告别多管缓冲液、操作简便。