【2024 EHA】通过早期预防性干预处理,CAR-T细胞疗法有望实现门诊...
表2住院原因在所有接受治疗的患者中,ORR为83%(95%CI,65%-94%)。CR率为67%(95%CI,47%-83%),见图1。图1接受治疗患者的最佳缓解率及最佳缓解率的敏感性分析CAR-T细胞扩增的中位峰值和曲线下面积分别为40.8cells/??L(范围,3.9cells/??L-696.7cells/??L)和298.8cells/??L×天数...
拜qPCR 所赐,我成功跻身实验室第一显眼包
A1:扩增曲线存在问题时,首先应确认基线校正或ROX校正前的原始曲线,扩增曲线的荧光信号值低多数是由于背景荧光信号值过高造成的。使用嵌合荧光法进行检测时,背景荧光信号偏高大多数是由于模板量过高,染料嵌入到初始模板DNA中发出荧光造成的。使用荧光探针法进行检测时,背景荧光信号偏高大多是由于设计的探针质量差使淬...
大规模新冠核酸筛查中出现的异常扩增曲线分析
该类型曲线反应孔多数会出现液面偏低情况,可能是扩增试剂分液不准确,或反应孔气密性差,反应过程中溶液蒸发引起探针浓度增加。03解决方案:配置试剂时注意检查试剂液面,核酸加样后用力压实封好反应板,上机扩增前再次检查有无缝隙。02倒“S”型原始曲线图:基线调整后曲线图:01曲线特点:曲线如倾倒的“S...
如何解析新冠核酸检测中的异常扩增曲线?
(1)软件在进行基线自动扣除的时候出现错误,引起了扩增曲线抬升。(2)选用的耗材、试剂或者操作的原因导致背景荧光信号有所波动,造成反应孔的自动基线扣除错误。(3)探针浓度过高,体系中有荧光物质污染,扩增效率低。解决方案:(1)采取手动调整基线的方法,重新定义基线即可正常(即将基线起点改为荧光信号稳定的循环数...
qPCR扩增曲线的自述
2.扩增效率低:反应条件不适宜或引物探针设计不当,建议通过绘制标准曲线确认扩增效率,同时对反应条件和引物探针设计进行优化。3.PCR产物太长:一般采用80-150bp的产物长度。如果扩增产物过长,建议用三步法程序扩增或优化引物。4.反应体系中可能有PCR反应抑制物:建议将模板梯度稀释后加入反应体系,或者重新制备纯度...
一文揽尽:荧光定量PCR扩增曲线哪个阶段最重要
由于线性期和平台期的扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR的产物量与初始模板量之间没有线性关系,所以也不能通过这两个阶段的PCR产物量计算出初始模板量(www.e993.com)2024年9月19日。想要知道初始模板量的多少,还要依赖指数期的Cq值进行计算。▲图1.qPCR反应的重要阶段如图所示,标准的扩增曲线是呈现S型的。曲线是否符合标准,不仅跟样本起始...
PCR异常扩增曲线案例分析与解决办法盘点!
基线不平滑,整体扩增信号杂乱,感觉整个扩增效果有点被抑制的情况。2分析:从整体来看整板扩增效果不是特别理想,然而进行样本单独分析时,发现问题仅出现在几个标本身上,这几个标本很多都是处于同一条八联管,抛开这几条有问题的八联管进行分析时其余结果未见异常曲线。
小曲线大学问-新冠核酸异常扩增曲线知多少?
基线设定不当的异常扩增曲线曲线特点:软件默认基线设定的扩增曲线呈波浪型,导致Ct值偏大,可能会被误判为阴性。原因分析:软件默认基线设定不准确造成扩增曲线异常。解决方案:根据检测试剂的要求设定适宜的基线。03软件优化造成的异常扩增曲线曲线特点:软件优化后扩增曲线向斜上方抬起,导致Ct减小,根据优化后扩增曲线...
核酸检测假阳性?令人哭笑不得的原因。
图13第二批16号相对曲线图14第二批16号原始曲线出现第二次异常曲线后,我静下心来整理思绪,开始分析原因:1、试剂配制过程试剂配制完全按照操作流程规范操作,无原则性错误。2、核酸提取过程样本经56℃灭火30min后进行核酸提取,吸样操作规范,核酸提取在全自动核酸提取仪中进行,减少了人为操作误差。
PCR异常扩增曲线原因及案例分析
常见异常曲线原因1确认软件设置是否正确对照试剂盒说明书,检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是,需要看下所选用的试剂中是否含有ROX来作为参比荧光染料。2确定耗材及仪器配件是否使用正确耗材对于荧光定量PCR来说比较重要,很多异常的扩增曲线是由于耗材使用不当引起的...