科学家开发非天然氨基酸eFSY,能在活细胞中鉴定直接的蛋白质相互作用

另外,裂解液也会极大地稀释蛋白质的浓度,这会导致真实蛋白质相互作用的丢失,以及导致假阳性蛋白质相互作用的产生。在蛋白质纯化的过程中,为了去除背景信号,通常需要针对蛋白质纯化的磁珠进行多次清洗,然而这样会导致丢失相对较弱的瞬时蛋白质相互作用。如果使用交联非天然氨基酸原位的共价来固定蛋白质相互作用,将在一定...

...中国农业科学院张波研究员等:碱提酸沉参数影响大豆分离蛋白...

研究表明,随pH值的降低,蛋白质表面电荷分布改变,颗粒间相互排斥增大,蛋白质空间构象从致密状态转变为疏松状态,因此β-conglycinin变性温度和变性焓值均下降,即较高的羧基质子化程度为低pH值条件下β-conglycinin的变性提供了驱动力。对于纯化的glycinin,在pH3.8的条件下,90～120mg/mLglycinin的DSC曲线具有两个热...

Phytomedicine | CETSA和TPP策略用于天然产物的靶点鉴定和药物...

(1)药物处理:完整细胞中天然产物的处理浓度与活性测定中使用的浓度基本一致,而WB-CETSA在细胞裂解液中进行时(通常是活细胞中测试浓度的10倍),需要更高的天然产物浓度才能获得良好的结果。这是因为药物会高效地转运到活细胞中,导致NPs在完整细胞中大量积累。与在细胞裂解液中(一般≤1h)相比,在完整细胞中(一般≥2...

《食品科学》:烟台大学孙蕾蕾副教授等:海参卵的活性物质研究进展

相较于雄性腺,海参卵中蛋白质含量较低,脂质含量更高,可能是因为海参精子主要构成是蛋白质,而脂质需供海参生殖发育。1.1海参卵蛋白、活性多肽及游离氨基酸海参卵富含蛋白质,是优质多肽的制备来源。海参卵中天然存在的多肽极少,目前发现海洋生物内源性活性肽主要包括肽类激素、组织肌肽、神经多肽等,海参中发现的神经...

Nature重磅综述 |关于RNA-seq,你想知道的都在这

由于mRNA片段化和基于beads的文库纯化过程中偏好150-200bp的片段,导致这个方案最后获得的cDNA片段都在200bp以下。每个样本平均测20-30millionreads,对每个基因或转录本进行定量,再统计分析差异基因(参考RNA-seq数据分析部分)。short-readRNA-seq结果很稳定,对RNA-seq的short-read测序技术多次测试比较发现,其平台...

2024重组胶原蛋白行业白皮书:从美业革新先锋到精准医疗动力源

优化发酵条件可以提高微生物或细胞的生长速度和蛋白质的表达量,从而缩短生产周期,提升生产效率(www.e993.com)2024年11月15日。而分离纯化的有效性直接关系到最终产品的纯度和活性,该过程能够去除杂质,确保产品符合医药和化妆品等高标准行业的质量要求。重组胶原蛋白发酵和纯化工艺流程数据来源:蛋壳研究院...

??研究蛋白质热稳定性的几种方法

比如做膜蛋白研究时,溶液环境中需要添加双亲性的分子,一端疏水一端亲水。这种情况荧光分子会直接结合到疏水端,导致直接产生荧光信号。并且染料种类的选择、浓度的选择也很繁琐。外源荧光染料DSF也可能会产生背景荧光以及非特异吸附等假阳性结果。05内源差示扫描荧光法(inDSF)...

关于内参蛋白Actin,那些你不知道的事儿

肌动蛋白的聚合取决于肌动蛋白单体对细丝末端的亲和力,肌动蛋白单体存在一个临界浓度(CC),当低于该浓度,肌动蛋白不会聚合;当单体浓度高于CC时,肌动蛋白将发生聚合,直到游离单体浓度等于CC。然而,当我们在体外研究肌动蛋白时,它的程度则取决于所使用的条件。举个例子,在4°C条件下,肌动蛋白在2mMMg2...

《食品科学》:江南大学李永富副教授等:绿豆蛋白α-淀粉酶抑制肽的...

因此绿豆蛋白中的高精氨酸、芳香族氨基酸和疏水氨基酸含量,可能是其肽具有高α-淀粉酶抑制活性的原因之一。此外,同3个分级蛋白相比,绿豆蛋白中含有更多的苯丙氨酸、亮氨酸、酪氨酸和精氨酸残基等胃-胰蛋白酶的切割位点,因此绿豆蛋白的水解程度最高,这有助于提升其肽对α-淀粉酶活性的抑制效果。

实用建议:如何合理设计稳定的冻干蛋白配方(二)

通常情况下,如果pH不是很低,如pH4左右或更低,这个应该不是很大的问题;●蔗糖在冻干过程中抑制蛋白去折叠方面看似比海藻糖更有优势,当蛋白在预冻阶段非常不稳定(需要较高的糖浓度)和/或蛋白浓度较高时,这种优势更明显。海藻糖的相对不稳定性是由于在预冻和干燥过程中其更易于与蛋白之间产生相分离。对于给定的...