疫苗前沿 | 重组戊型肝炎疫苗宿主细胞残余DNA荧光染色法检测方法...

由于一定DNA浓度范围内荧光强度与DNA浓度成正比,因此可根据荧光信号强度计算重组HepEV供试品中的DNA残留量。同时,根据中国药典2020年版三部(药典三部)中分析方法验证指导原则对建立的残余DNA定量方法进行方法学验证。1材料与方法1.1供试品重组HepEV吸附前原液,由兰州公司第四研究室制备。1.2主要试剂及仪器...

你做质粒提取实验时,是否也遇到了这些常见问题?

4、质粒DNA产量低或提取失败的原因?l菌种活性不佳:如菌种保存时间过久,质粒可能丢失,建议培养前先划线活化,以稳定产量;如大肠杆菌太陈旧(低温下长期保存的菌等),建议重新涂板培养后挑选新菌落进行液体培养;l未充分裂解细菌:细菌需充分重悬,成团的细菌会因无法裂解降低产量;l裂解时间过长;l质粒本身拷贝数低。

细胞电穿孔导入 DNA 的动态特征

DNA浓度和纯度DNA的浓度过高可能会导致细胞过载，影响细胞的正常生理功能，并且可能增加DNA之间的相互作用和聚集，降低DNA的导入效率。而DNA浓度过低则可能会减少与细胞接触的机会，也会降低DNA的导入量。因此，需要选择合适的DNA浓度，以确保在不影响细胞正常功能的前提下实现有效的基因传递。同时，...

超微量分光光度计测dna浓度准吗?

这种技术使得超微量分光光度计在测量DNA浓度时更加可靠和准确。论点三、无需稀释的样品检测与传统光度计不同,超微量分光光度计无需对样品进行稀释处理,即可准确测量样品的浓度。其测量范围远超常规光度计,达到甚至超过150倍以上,因此具备了更高的灵敏度和准确性。多功能的应用特点除了测量DNA浓度外,该光度计还...

中国科大在基因转录调控研究中取得突破性进展

通过对原有ChIP实验方法进行改进和优化,克服了两个转录因子秀丽线虫中表达量小、表达时间窗口短、表达的D型神经元细胞占秀丽线虫细胞比例少(约占2%)等瓶颈,成功地完成了ChIP实验,拿到了可供高通量测序(ChIP-seq)的DNA样品。这也是第一次实现了在多细胞动物中原位表达水平转录因子的ChIP-seq实验。转录因子是调控细胞...

重磅发布|中疾控艾滋病检测实验室质控指南:流式/PCR/基因测序仪质控

5.1吸液不准确是导致检测错误的最常见原因(www.e993.com)2024年11月18日。核查人员是否经过周期性培训和测评,移液器是否定期校准。5.2仪器设置是否按照生产厂家的要求用商业化的校准物质(如荧光微球)校准流式细胞仪并建立档案,监测仪器的性能变化。5.3核查试剂是否在有效期内。5.4全血质控品染色后的活力验证(不使用含固定剂溶血素溶血的情况下...

Nature重磅综述 |关于RNA-seq,你想知道的都在这

首先,用于建库的RNA分子需要是全长转录本,但由于RNA提取、分离过程中会导致RNA断裂或实验过程中RNA降解,使得理想状态并非总能实现。这种情况在短读长RNA-seq中也会导致可控的3??端偏好,但对定位于应用长读长的RNA-seq分析全长转录组的研究者来说,即使是低水平的RNA降解,效果也会受限。因此,相关研究者需要在RNA...

血浆DNA提取试剂的选择标准

近几年来,随着基因诊断技术的发展,游离DNA的应用价值越来越大,如优生筛查、肿瘤早期诊断、遗传病检测和病原体感染基因检测等。但血液中游离DNA含量一般较低,片段较小,不易提取,这大大影响了游离核酸的基因检测和各种研究的开展。游离DNA提取方法一般有TRizol方法、离心柱法、磁珠法。其中,Trizol方法与离心柱相比,...

国内首个!《动物病原微生物宏基因组高通量测序技术规范专家共识...

2.2核酸提取提取样品核酸时,可选用自动化提取或者手动提取。根据测序目的和建库要求,提取方法可选用DNA提取、RNA提取或者DNA和RNA共提取。宏基因组高通量测序样品类型复杂,对文库核酸的纯度和浓度要求高,且细菌、真菌、寄生虫、支原体等微生物提取难度大,建议使用经过验证可用于宏基因组高通量测序的核酸提取试剂[10]。

进化史上最幸运的8项基因突变

人类进化到现在就是由无数的有益突变促成的。突变是随机的,正常情况下突变频率很低,但在如放射性辐射、致癌化学制品等不利条件刺激下,突变频率会大大提升。有研究发现:对Y染色体的DNA序列分析透露,人类基因从上一代传递到下一代,每次会累积100到200个新的突变。这一数字是人类基因突变率的首次直接测量——它相...