Folin—酚试剂测蛋白含量实验操作方法

测定后,可以从标准曲线中查出未知样品浓度。若用0.5厘米光程的比色杯进行比色,可按下面方法进行操作:取0.2毫升样品溶液(约含5-100微克多肽或蛋白质),加入1毫升试剂甲(可选用0.3-0.5厘米直径的小试管)混匀,10分钟以后,再加入0.1毫升试剂乙,立即混匀,30分钟后比色,一般来说,若多肽或蛋白质浓度在2-25微克,则...

蛋白质浓度测定常用的三种方法

通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。研究发现,染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合。突出优点(1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最di蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的...

WB如何快速蛋白定量(Bradford 法)

1.蛋白浓度不能太高,如果超过了标准曲线的范围(比如OD>2),那就测量不准了。不仅是本方法,所有基于浓度标准曲线的方法都是如此,比如ELISA。当然也不能太低了。2.大约10年前就有文献报道测量双波长,即A595和A450的比值能够获得良好的线性关系并提高灵敏度,这种方法我试过了,在0.125-1.5mg/m...

综述:超微量紫外可见分光光度计仪器及应用现状分析

双缩脲法(546nm),BCA法(562nm)与Lowry法(750nm)法均依靠碱性溶液中二价铜离子和肽键的反应生成在相应波长处有吸收值的复合物测定蛋白的浓度。4、其它方面的应用微量UVS的应用非常广泛,特别在生物工程研究及一些生物检测技术工作中都是必不可少的分析检测仪器。例如:生物克隆技术、PCR技术、基因工程技术...