沃信:分子杂交仪箱(杂交炉 杂交箱)功能、原理和应用场景分享
分子杂交仪:基于核酸分子的变性和复性原理。在变性条件下,DNA或RNA双链解离成单链;在复性条件下,单链重新组合成双链;在杂交条件下,特异性探针与目标DNA或RNA片段进行杂交。通过检测杂交信号的有无和强度,可以判断样本中是否存在目标序列。基因测序仪:则主要基于Sanger发明的双脱氧链末端终止法或Maxam-Gilbert发明的...
沃信:分子杂交箱(杂交炉)在基因表达分析等领域的应用
基本原理:通过检测RNA的杂交反应,研究基因在特定条件下的表达水平和调控机制。分子杂交仪能够提供稳定的杂交环境,确保杂交反应的准确性和可靠性。应用实例:在基因芯片实验中,分子杂交仪用于将标记的RNA或DNA探针与固定在芯片上的DNA序列进行杂交,通过检测杂交信号强度来评估基因的表达水平。2.突变检测应用目的:通过...
Nat Rev Cancer综述|环状RNA——癌症研究新前沿
常用的共定位检测技术包括单分子circRNA荧光原位杂交共定位、天然circRNA免疫沉淀和DNA-RNA免疫沉淀;最近的一种生化技术共定位交联和免疫沉淀(CoCLIP),可对RNA-蛋白质相互作用进行亚细胞分辨率研究。一系列核蛋白和RNA运输蛋白都与circRNA的核输出有关,包括人类输出蛋白(XPO)家族中XPO1、XPO2和XPO4三种蛋白。目前已确定...
原位杂交仪可用于了解DNA或RNA序列在细胞组织中的定位表达
原位杂交仪的工作原理是利用特定的探针与目标DNA或RNA序列进行杂交,然后通过荧光标记或**组织化学方法进行可视化。这种方法具有高灵敏度和特异性,可以检测出单个基因或转录本在细胞中的表达水平。原位杂交仪的应用范围非常广泛,包括但不限于神经科学、发育生物学和发现。例如,在神经科学中,原位杂交仪可用于研究特定基因...
Nat Commun | 张鹍团队开发多重RNA原位杂交技术DART-FISH,可准确...
DART-FISH是通过锁式探针捕获目标转录本和滚环扩增(RCA)来产生原位特征,然后通过序列等温杂交进行高度稳健的解码。为评估人体组织中的RNA含量以及cDNA分子的原位保留情况,研究团队在反转录引物上添加了一个5’handle,以使所有具有荧光寡核苷酸的cDNA分子可视化,并将这一方法命名为“RiboSoma”。此外,为实现高复用性,研...
利用新型LoopRNA技术对细胞和组织中的特定核酸序列进行空间定位
原位杂交(ISH)是一种用脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)探针对福尔马林固定、石蜡包埋的FFPE细胞和组织样本中特定核酸序列进行精确空间定位和检测的方法(www.e993.com)2024年9月16日。这项技术的正式诞生可以追溯到1969年,当时耶鲁大学研究员约瑟夫·加尔和研究生玛丽·卢·帕杜发表了里程碑式的论文,表明核糖体DNA序列的放射性拷贝可以检测到青蛙...
Nature Methods | 解码RNA与蛋白质相互作用的新视角:TREX技术的突破
TREX(TargetedRNaseH-mediatedExtraction)技术,是一种创新的生物技术,旨在精确识别和分析活细胞中特定RNA区域与RNA结合蛋白(RBPs)之间的相互作用。该技术通过利用RNaseH酶的特异性降解能力,配合定制的DNA探针精准靶向RNA序列,实现对特定RNA区域结合蛋白的有效提取和鉴定。此过程中,DNA探针与目标RNA形成DNA/RNA杂交复...
Cell 50周年专刊 | 华大发表长篇综述,解析时空组学在生物学和医学...
基于原位成像的方法,如荧光原位杂交(FISH)和原位测序(ISS),使得科学家能够在细胞内直接观察到RNA和DNA的分布。早期的技术,例如smFISH,已经能够实现对单个RNA分子的高分辨率成像。随着技术的发展,现代时空转录组学技术如MERFISH和seqFISH,可以在单个细胞中同时检测到成千上万个基因的表达。相比而言,基于测序的时空转录组...
Nat Commun:通过靶向作用控制DNA复制压力的关键基因或有望治疗...
当细胞分裂时,其会复制自己的DNA,这样细胞就有了完整的遗传信息,双链DNA能被解开并分类成两条单链,每一条单链都能作为模版通过结合RNA来产生两个相同的副本,一种称之为R-环的DNA:RNA杂交结构或许有助于解开DNA链,并在DNA双链解开时帮其稳定。通过靶向作用控制DNA复制压力的关键基因或有望治疗人类脑癌。
遗传学检测方法比较:荧光原位杂交(FISH)vs 微整列比较基因组杂交...
荧光原位杂交技术(FISH)FISH是一项分子细胞生物学技术,广泛用于检测和定位细胞中的DNA序列。该技术应用特异性的荧光标记探针与染色体或核酸样本进行杂交,通过荧光显微镜实现目标DNA或RNA序列的可视化。实现FISH技术主要包括以下的几步骤:1.样本制备阶段提取细胞或组织样本,通过固定和制片的过程使样本处于适合杂交的状...