分子互作|蛋白与蛋白、核酸、小分子互作检测技术介绍、应用及资料...
3、筛选和目标蛋白相互作用的未知蛋白,一般结合质谱实验;02GSTpulldown??原理GSTpulldown技术基于GST标签和谷胱甘肽(GSH)的特异性高亲和力,将带有GST标签的目标蛋白固定于GSH琼脂糖珠上,当细胞裂解液经过该基质时,与目标蛋白有相互作用的蛋白或者大分子会被吸附,而没有被吸附的杂质则随缓冲液流出。...
DMFold:精确到氨基酸的互作蛋白结合位点预测分析工具
分子生物学相关研究中,蛋白质互作经常会涉及到,通过Co-IP、酵母双杂交、GST-pulldown、BiFC、荧光共振能量转移(FRET)、免疫荧光共定位、邻位连接技术(PLA)等方式验证蛋白质之间的相互作用。在此基础上,进一步通过截短突变体探索蛋白质之间的互作结构域,甚至是通过氨基酸点突变为丙氨酸来确定互作的氨基酸位点。在没有...
ACS Nano:科研人员发展新型蛋白质互作成像技术
BiFC技术是一种可在细胞内成像蛋白质相互作用的方法,其原理是将一个完整的荧光蛋白分割成两个非荧光片段,再将这两个非荧光片段分别与可能发生相互作用的两个目标蛋白连接形成融合蛋白,当目标蛋白在细胞内相互作用时,这两个非荧光片段会由于空间距离的靠近形成完整的荧光蛋白。然而,在目标蛋白不发生相互作用的情况下,...
看一看你多了解蛋白质相互作用?
Fluorescenceco-localization,在过去,这个技术一般用于细胞内辅助证明蛋白相互作用,前些年,如果是其他物种的蛋白质,你应用酵母双杂交系统验证了它们的相互作用,reviewer可能会说你这个并不能反映原物种中的真实情况,可能是假阳性。这个时候,一些研究者就将这两个蛋白分别与不同颜色的荧光蛋白融合表达于原物种细胞当中,...
...广州实验室徐涛院士团队提出研究细胞器互作位点蛋白质组的新方法
2023年7月16日,广州实验室徐涛院士团队在CellPress细胞出版社期刊iScience上发表了题为“AProximityLabelingStrategyEnablesProteomicAnalysisofInter-organelleMembraneContacts”的论文,提出了一种基于双分子荧光互补技术的邻近标记方法(BiFCPL),在以细胞器互作位点为代表的空间蛋白质组学的研究上具有广阔的应...
广州实验室徐涛院士团队iScience:研究细胞器互作位点蛋白质组的新...
2023年7月16日,广州实验室徐涛院士团队在CellPress细胞出版社期刊iScience上发表了题为“AProximityLabelingStrategyEnablesProteomicAnalysisofInter-organelleMembraneContacts”的论文,提出了一种基于双分子荧光互补技术的邻近标记方法(BiFCPL),在以细胞器互作位点为代表的空间蛋白质组学的研究上具有广阔的应...
陈明海:开发生物传感系统,在不同尺度检测蛋白质/核酸等互作
开发基于片段互补技术的生物分子传感系统生物体的许多生命过程,如细胞的信号传导、细胞骨架的形成以及细胞的代谢,均受到蛋白质之间相互作用的调控。目前研究蛋白质相互作用的方法主要有:基于抗原抗体相互作用的免疫共沉淀、表面等离子体共振技术、用于大规模筛选的酵母双杂交系统,以及基于供体与受体之间的荧光共振能量转移技...
北京林业大学林金星团队发表活体检测蛋白互作技术方面综述论文
该综述第二部分重点阐述了以蛋白片段互补分析技术(proteinfragmentcomplementationassay,PCA)为基础研究蛋白相互作用的技术,主要包括双分子荧光互补技术(BiFC),例如把YFP荧光蛋白分成nYFP和cYFP两部分,然后将两个检测蛋白A和B分别与nYFP和cYFP构成融合蛋白A-nYFP和B-cYFP,最后通过瞬时表达检测YFP荧光表达情况,从而...
缪颖团队:解析逆行信号分子WHIRLY蛋白位移诱导叶片衰老的分子细胞...
本研究团队使用酵母双杂交,双分子荧光互补(BiFC)和细胞器蛋白质免疫共沉淀(CoIP)实验,在体内和体外证明了UPL5与细胞质,质体、线粒体和细胞核中的WHY2相互作用,调节WHY2在质体、线粒体、细胞质、以及细胞核的分布和蛋白质丰度(图1)。WHY2赖氨酸位点的序列突变的生化证据表明,Lys45和Lys227分别被UPL5选择性...
解析表观遗传学的工具——ATAC-seq(二)
题目:核纤层样蛋白OsNMCP1与染色质重塑复合物OsSWI3C相互作用来调控染色质可及性从而调节抗旱性和根系生长期刊:NewPhytologist发表时间:2020.2.18影响因子:10.323技术手段:亚细胞定位、RT-qPCR、WB、ATAC-seq、RNA-seq、Y2H、Co-IP、BiFC该文章的研究对象是核纤层样蛋白OsNMCP1与染色质重塑复合物OsSWI3C,...