Sanisure PharmaTainer??储液瓶培养基瓶-如何构建高效的瞬转平台
在构建时需要注意的点是,目标基因前面加上信号肽和kozak序列,构建的过程中尽量使用同源重组的方法防止移码突变,目的基因最后必须加终止密码子。质粒抽提对于少量的质粒抽提,可以选用控内毒的质粒抽提试剂盒,现在一些国产的试剂盒完全可以满足实验的需要。对于大量的质粒抽提,可以使用层析的方式,可以针对不同的实验要...
...利用纳米孔测序技术首次在蔬菜中发现新型多重耐药质粒
质粒全序列分析,推测质粒pHNBY4G-1中blaNDM-5基因可能是通过IS26、ISKpn19、??Tn2、??Tn3等多个插入序列和转座子的同源重组事件后获得。类噬菌体质粒p0111质粒pHNGDSC2239PM-1中可变区结构与IncHI2/ST3型质粒pHNGDSC1999-1中的相似,推测可能是由2个同向的IS26产生的环状中间体介导整合至p0111质粒中。
"基因敲除狗"是怎么造出来的
如在医疗健康领域,用iPS细胞(诱导多能干细胞)治疗人类的镰刀形贫血症,可以将病人的皮肤细胞诱导成iPS细胞,利用CRISPR/Cas9技术介导同源重组来修复发生突变的血红蛋白基因,再将修复的iPS细胞定向诱导分化为造血干细胞移植到病人体内。此外,像使用CRISPR技术根除HIV病毒、诱导宫颈癌细胞自我毁灭、构建癌症模型等最新成果先后...
Genome??Medicine:发现肺炎克雷伯菌毒力质粒的非自主转移
本研究观测到的转移形式包括:(1)毒力质粒单独转移,(2)毒力质粒与IncF接合质粒共同转移,和(3)毒力质粒和IncF接合质粒形成杂合质粒进而转移。既往报道的含有耐药基因和毒力基因的杂合质粒被认为是通过同源重组或IS26介导等方式形成;而本研究发现了另一种杂合质粒形成的方式,即在特定的28-bp位点发生两次DNA单链切割...
...生科院欧竑宇研究组和瑞金医院合作发现肺炎克雷伯菌毒力质粒的...
本研究观测到的转移形式包括:(1)毒力质粒单独转移,(2)毒力质粒与IncF接合质粒共同转移,和(3)毒力质粒和IncF接合质粒形成杂合质粒进而转移。既往报道的含有耐药基因和毒力基因的杂合质粒被认为是通过同源重组或IS26介导等方式形成;而本研究发现了另一种杂合质粒形成的方式,即在特定的28-bp位点发生两次DNA单链切割...
瞿介明教授团队揭示肺炎克雷伯菌毒力质粒转移新机制:接合型IncF...
毒力质粒转移的多种机制杂合质粒的新型融合机制既往报道的含有耐药基因和毒力基因的杂合质粒被认为是通过同源重组或IS26介导等方式形成,而本研究发现了另一种杂合质粒形成的方式,即在特定的28-bp位点发生两次DNA单链切割和交换而形成融合(www.e993.com)2024年10月18日。在GenBank收录的2608个肺炎克雷伯菌质粒中,99%的毒力质粒和32%的接合型...
Cell丨拓宽对同源重组的理解—同源重组过程中同源搜索的主动机制
研究人员首先利用全内反射荧光显微镜(TRIF)建立出同源搜索的可视化技术,同时构建出同源搜索反应体系:线性的CURMID(pUC19质粒加入9.5kb的λ噬菌体DNA)一端用biotin标记、一端DIG标记,固定在样品室(samplechamber)表面,PSCs和Atto565-DNA复合物,供体dsDNA,GFP-Rad54,RPA等。GFP-Rad54、Atto565-DNA和供体dsDNA三者共定...
AAV载体构建莫发愁,金唯智Hi-Fi技术为你解忧!
目前,rAAV质粒主要在细菌中扩增。然而,由于细菌中同源重组系统,ITRs经常发生重排。细菌繁殖后,rAAV质粒中最常见的突变之一是ITR的B-B’或C-C’臂缺失(图2)。这种缺失使T型ITR发夹的茎更长,比野生型ITR更加稳定。图3:AAV2的ITR区域中B-B’臂缺失的示意图。野生型AAV2的ITR区域是一个125bp的T型发夹结构,...
Genome Medicine:发现肺炎克雷伯菌毒力质粒的非自主转移
本研究观测到的转移形式包括:(1)毒力质粒单独转移,(2)毒力质粒与IncF接合质粒共同转移,和(3)毒力质粒和IncF接合质粒形成杂合质粒进而转移。既往报道的含有耐药基因和毒力基因的杂合质粒被认为是通过同源重组或IS26介导等方式形成;而本研究发现了另一种杂合质粒形成的方式,即在特定的28-bp位点发生两次DNA单链切割...
扈荣良:非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗构建和免疫保护特性研究
本研究利用国内报道的第1起疫情的病毒分离株SY18株首先构建了MGF、CD2v单基因缺失和二者的双基因缺失共3株重组病毒。动物安全性和免疫效果试验证明,MGF基因单缺失和MGF、CD2v双基因缺失毒株对免疫猪既具良好的安全性又呈现很好的攻毒保护效果,现将相关研究结果报告如下:首先构建同源重组用质粒。从ASFV流行株SY18株...