使用祖先序列重建设计高功能热稳定蛋白
从该分析中选择的祖先II类KARI通过差示扫描荧光法测得的熔解温度(Tm)为59??°C,而大肠杆菌和水稻中现存的II类KARI的熔解温度分别为42–44??°C(图5b)。此外,该酶对2-乙酰乳酸的转换数(kcat)和比活性比大肠杆菌中的现有形式高8倍,尽管其米氏常数(Km)比大肠杆菌中的形式高5倍(图5c)。在不同温度下孵育1...
脱氧核糖核酸酶I(DNase I)特性及应用(提供检测试剂盒)
最常用的方法反应原理,即通过脱氧核糖核酸酶的解聚作用,而于260nm处测量吸光率的增量。在特定的条件下,温度为25℃时,每毫升溶液每分钟能使吸光率增加0.001,即定为一个活性单位。
丙二醛(MDA)测定的意义
MDA测量原理丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标,在较高温度(95度)及酸性环境中可与硫代巴比妥酸(thiobarbituricacid,TBA)缩合,形成红色的MDA-TBA加合物,相应的反应原理图,如下:该产物在532nm有最大吸收峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定600nm下的吸光度,利用532nm与600nm下的吸光度的差...
杨倩┃米根霉α-淀粉酶保守区域组氨酸突变及功能性质
米氏常数测定:分别以4、10、15、20和40mmol/L麦芽三糖为底物在标准酶活力测定条件下反应,以生成的麦芽糖为目标产物采用Lineweaver-Burk双倒数法计算酶对麦芽三糖的米氏常数;采用相同方法,分别以0.2、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0和6.0g/L可溶性淀粉为底物,以还原糖(以麦芽糖计)为目标产物计算酶对可溶性淀粉的...
...教授等:基于Cu,Fe-N-C氧化酶活性构建邻苯二甲酸酯荧光检测探针
建立了一种基于Cu,Fe-N-C纳米酶氧化物模拟酶荧光探针检测发酵食品中PAEs新方法。研究先以热解法制备双原子Cu,Fe-N-C纳米材料,该纳米材料具有模拟酶氧化酶特性,催化氧化底物OPD,使生成有荧光的DAP。PAEs可以使Cu,Fe-N-C/OPD催化体系荧光线性增强。从而建立了DMP的检测方法,方法的LOD可达到0.76μg/L,完全满足...
中国医药工业研究总院药理学专业生物化学2023年考研自命题科目...
9)DNA双脱氧末端终止法、Southernblot杂交、Northernblot杂交、DNA芯片技术和PCR等技术原理及其应用;RT-PCR和Real-timePCR技术原理及应用(www.e993.com)2024年11月16日。限制性核酸内切酶的概念与特点,载体的概念;质粒的特点,基因克隆的基本过程;外源基因在大肠杆菌和哺乳动物细胞中表达的基本要素。
湖大谭蔚泓院士团队:聚吡咯复合凝胶,现场手机比色法检测胆固醇
在这里,V和Vmax代表初始和最大反应速度,Km代表米氏常数,[S]是底物浓度。根据该方程式,可以计算Km和Vmax并评估过氧化物的模拟酶活性。如图2A,B所示,V随着TMB或H2O2浓度的增加而增加,并且氧化反应遵循典型的Michaelis-Menten行为。PPyNPs对TMB(0.293mM)和H2O2(0.184mM)的计算Km值低于文献中报道的纳米酶的Km值。
化合物体外筛选试验中重要指标介绍
KB表示在拮抗剂-受体复合物的平衡解离常数,在效能测试中测定,表示对生理反应的拮抗作用。KA表示激动剂-受体复合体的平衡解离常数。Ki则表示在生化结合测试中或酶测试中拮抗剂-受体复合物的平衡解离常数。Km全称为米歇利斯常数,也称为米氏常数,通常用于表示反应速率为最大值Vmax一半时,底物的浓度,常用于衡量底物对酶...
2022年卫生资格考试前,检验人必懂的100个基本概念!
利用某些物质被紫外光照射后所发生的能反映出该物质特性的荧光,可以进行定性或定量分析的方法。55.标准溶液亦称基准溶液,是浓度已经准确测知的溶液。56.米氏常数简指反应速度v为最大速度V的一半时所需的底物浓度。57.同工酶在同一种属中其理化及生物性质不同而能催化相同反应的酶。