实验安全 | 拒绝成为实验“耗材”,核酸提取“避毒”指南请查收~
TRIZOL是一种经典的总RNA抽提试剂,具有高样本兼容性。除了作为单一试剂使用,TRIZOL也可搭配自动化和核酸吸附柱,被广泛应用于RNA提取,虽然它不是直接的致癌物质,但主要成分为苯酚,且提取过程需要添加氯仿,因而也具有一定的危险性。Vazyme推出无需氯仿的“FreeZol”试剂,采用独特、无毒稀释液DBBuffer代替氯仿进行分层。...
《iMeta》综述 | 多组学在肿瘤微生物研究中的应用
在RNA生物学领域,RNA-seq已广泛应用于研究单细胞基因转录、蛋白质表达和RNA结构。RNA-seq技术的进步也进一步促进了空间转录组学的出现和发展;直接长阅读或全长RNA-seq方法、以及不断更新的数据分析方法,使研究人员能够更好地了解RNA生物学(包括转录过程机制以及折叠和分子间相互作用对RNA功能的影响)。总的来说,RNA-...
实验室常见有毒试剂有哪些?注意事项及应采取防护措施
1-3RNA提取及PCR等实验:苯、二甲苯、酚、trizol、氯仿等有机溶剂可致癌,DEPC(焦炭酸二乙酯)用于溶解RNA,潜在的蛋白质变质剂。1-4蛋白电泳:PMSF用于蛋白提取,高强度毒性;SDS(十二烷基硫酸钠)用于SDS-PAGE电泳凝胶配置,有刺激作用,可引起呼吸系统过敏性反应;丙烯酰胺(未聚合)蛋白电泳凝胶原料,潜在神经毒性;TEMED(...
实验室最不稳定的是什么?RNA 和我提取失败后的情绪
在RNA提取过程中,提高RNA产量和质量的最佳方法是保证样品完全裂解。然而,不用的样本需要针对性的设置裂解方案。例如,血细胞(如淋巴细胞、PBMCs等)和微生物细胞往往很难有效溶解,仅仅添加基于洗涤剂的裂解缓冲液可能并不够。为了提高裂解效果,可以将裂解缓冲液与机械裂解步骤(研磨珠破碎)匹配,或者在裂解液上游加...
上新| 精研细磨,RNA提取试剂升级,两款新品随心选!
研究RNA,提取是第一步,纯度和完整度则是判断RNA质量的重要指标,而RNA由于其羟基化学活性和易被RNase降解等特点,一直是科研小伙伴们面临的难题。诺唯赞推出沉淀法总RNA提取试剂升级版(Vazyme#R411&Vazyme#R711),让RNA提取不再成为科研路上的绊脚石。
磁珠法提取动物组织RNA 如何判断提取质量?
核酸提取传统方法传统的提取方法主要有酚/氯仿抽提法和硅胶柱法,这些传统提取方法可从不同组织样本中分离出DNA和RNA(www.e993.com)2024年9月30日。但这些技术中包含沉淀和离心等操作步骤,其所需的生物样本量较大,提取步骤较为繁杂、费时费力,得率也不高,难以实现自动化操作。另外,大部分的传统方法中还需要用到有毒化学试剂,对操作人员的健康...
RNA提取又失败了,咋肥四?
Trizol是一种新型总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出的核酸酶。1.Trizol试剂含有苯/酚,具有毒性和刺激性,注意操作。2.RNase污染的主要来源是操作过程中手和空气中的浮沉,注意配带手套,样品尽可能盖严;3.细胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低最后得率,因为一部分RNA...
RNA的提取与提纯
DNA的主要功能是记录遗传信息,而RNA主要功能是转录和翻译DNA的遗传信息,其实RNA还有其他的一些功能,比如RNA是很多病毒的遗传信息,RNA也具有一定的催化作用。本人最近在做RNA相关实验,因此需要用到RNA的提取和纯化,今天就和大家分享一下我用到的RNA提取和纯化的方法和心得,如果大家有更好的意见,也欢迎指正。
RNA 提取是玄学吧?我忙碌大半天,师兄只用了 8 分钟
采用特殊细胞裂解系统,无需苯酚、氯仿抽提等步骤,简单快速。细胞或者组织通过吹打裂解或者匀浆裂解在裂解液中充分释放RNA,裂解产物通过上柱、gDNARemover处理后、洗涤和洗脱这4步,即可获得高质量的RNA,可用于RT-PCR、RT-qPCR等实验。产品特点:...
高通量测序之RNA提取那点事~~
2.氯仿在RNA抽提过程中的作用苯酚对蛋白质的变性作用远大于氯仿,但是酚的比重略比水重,碰到高浓度的盐溶液,离心后酚相会跑到上层,不利于含RNA的水相的回收;但加入氯仿后可以增加比重,使得酚/氯仿始终在下层,方便水相的回收;另外酚与水有很大的互溶性,如果单独用酚抽提,抽提后仍有大量的酚溶解到水相中,其会抑...