惊天复活术!10 年老样本这么做照样提 RNA、DNA
针对这些难点,研究人员已经开发了一系列优化方法和技术,如使用优化的核酸提取试剂盒、改进脱蜡方法、优化蛋白酶K消化条件等,以提高FFPE样本中核酸的提取效率和质量。同时,严格的质量控制措施也是确保提取成功和后续实验结果准确性的关键。师姐面对以上问题,如果只靠优化的核酸提取试剂盒,改进脱蜡方法、优化蛋白酶...
微孔板离心机(小型迷你离心机)是如何DNA/RNA提取和纯化实验的
裂解后,可能需要加入特定的试剂(如蛋白酶K)来去除蛋白质等杂质,并通过离心等步骤将核酸与其他成分分离。离心作用在此过程中,微孔板离心机发挥关键作用。通过离心,可以将微孔板中的液体样品分离成不同的层,通常包括含有DNA/RNA的上清液和沉淀的杂质。离心机的高速旋转使得样品中的颗粒根据密度和大小分离,从而有效地...
特别关注|SREBP在非酒精性脂肪性肝病中的作用机制及治疗靶点
因此,推测SREBP抑制剂可能在以下几个方面发挥作用:(1)抑制SREBP基因的表达;(2)刺激SCAP和INSIG之间的相互作用,将前体SREBP锚定在内质网上;(3)阻断SREBP-SCAP复合物从内质网向高尔基体的迁移;(4)抑制2种位点特异性蛋白酶S1P和S2P;(5)阻止成熟SREBP进入细胞核;(6)加速N端SREBP降解;(7)miRNA。针对以上靶点机制进行...
Nat Struct Mol Biol | 张金伟团队揭示长链非编码RNA NEAT1成熟和...
利用高精度时间相关单光子计数(TCSPC)和圆二色性(CD)分析,文章作者发现3’端带有一个CCA尾的menRNA在没有蛋白酶结合或者作用的情况下自身发生了显著构象变化,自主产生了三碱基的侧凸并重组了附近的碱基配对,以此指示CCA添加酶进行第二轮的CCA添加。然后,文章作者去除了CCA添加酶的尾部或者与尾部直接接触menRNA的臂...
...黄冈师范学院李士明教授:苦瓜及其植物化学物质的免疫调节作用...
苦瓜提取物具有显著的抗糖尿病、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤、抗微生物和免疫调节活性。例如,苦瓜的果实和种子富含一些失活蛋白,包括苦瓜30kDa的抗HIV蛋白(MAP30),α-华支素、β-华支蛋白、γ-华支肽,δ-华支睾吸虫素和ε-华支肝吸虫素,它们具有RNAN-糖苷酶活性,多核苷酸腺苷糖苷酶活性,DNA酶样活性,磷脂酶...
「耀文解读」环状RNA(circRNA) 新应用:赋能CRISPR-Cas临床诊断
到目前为止,所有基于CRISPR-Cas系统的生物传感器都需要线性化的CRISPRRNAs(LcrRNA),以引导Cas蛋白识别特异性核酸序列,触发Cas蛋白酶介导的ssDNA和ssRNA报道分子的侧支切割(www.e993.com)2024年11月18日。天然或人工合成的共价闭合环状RNA(circRNAsorcRNAs)因相较于线性化分子表现出不同的结构和功能,很少被应用于CRISPR-Cas生物感应系统的...
溶瘤病毒工程与应用:癌症免疫疗法视角
一些研究已经修改了腺病毒以编码松弛素以降解基质金属蛋白酶(MMPs),这反过来降解ECM。为了增加组织通透性,溶瘤腺病毒被修改以编码透明质酸酶以靶向ECM中的透明质酸。其他改变溶瘤病毒机制的策略,如将内切核酸酶DNaseI添加到溶瘤腺病毒中,可以消除游离DNA并增强病毒传播。溶瘤HSV表达血管抑制素-120能够传播病毒并...
【沃信】咋用超声波细胞粉碎机(破碎仪)进行高质量RNA/DNA提取
三、提取过程样品破碎使用适当的方法破碎样品细胞,如超声波法、高压均质法、玻璃珠法等。注意控制破碎时间和功率,避免过度破碎导致RNA/DNA降解。裂解与去蛋白加入裂解液裂解细胞,并释放RNA/DNA。使用蛋白酶K等试剂去除蛋白质等杂质。分离与纯化
各种HIV药物的“前世今生”
HIV-1蛋白酶由99个氨基酸组成,可裂解Gag和Gag-Pol聚合物的祖细胞,产生成熟的活性蛋白质。大多数HIV蛋白酶抑制剂在肝脏中通过细胞色素P450(CYP450)酶进行代谢,该酶具有抑制药物代谢酶CYP4503A4(CYP3A4)的强大潜力(Dash和Boix,2021),从而抑制HIV在体内的繁殖并获得抗病毒作用。
动脉粥样硬化中的DNA甲基化和组蛋白修饰及其表观遗传治疗视角
DNA甲基化是一种动态可逆的修饰过程,是指在DNA甲基转移酶(DNMTs)作用下,胞嘧啶鸟嘌呤(CG)中的胞嘧啶转化为5-甲基胞嘧啶(5mC)的过程。在此过程中,S-腺苷甲硫氨酸提供一个甲基,而DNA去甲基化酶10-11易位蛋白(TET)将5mC转化为5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)。DNA甲基化分为三个阶段:建立(denovoDNA甲基化)...