干货分享:蛋白质融合表达的标签及切割研究汇总

融合标签的作用是用于检测和纯化目的蛋白,有时也用来增加目的蛋白在细胞质中的可溶性或帮助将目的蛋白运转到细胞周质中以提高目的蛋白的生物活性。(1)多聚精氨酸-标签(Arg-tag)精氨酸-标签通常由5或6个精氨酸组成。它已被成功用作细菌C末端标签,精氨酸是碱性最强的氨基酸,带5个精氨酸标签的蛋白质可以结合到阳...

用益生菌帮助抗癌!《自然》:全新细菌疫苗一箭双雕,清除肿瘤还能...

▲改造大肠杆菌可以有望带来癌症细菌疫苗的治疗策略(图片来源:参考资料[1])除了将新生抗原序列插入Nissle1917的基因中,作者还额外进行了一些设计,比如去除细菌的两种蛋白酶来增加新生抗原累积,另外抑制细菌产生免疫逃逸的机制,让细菌在完成任务后或找不到肿瘤时逐渐被免疫系统清除。随后,作者尝试将CT26肿瘤移植到了小...

灵魂追问:胶原蛋白究竟有没有未来?

合成蛋白质需要用到一个转运的酶,就是氨酰-tRNA合成酶,这个酶只能转运单个的氨基酸,相当于是小卡车运着一个氨基酸过来,一次还只能运一个氨基酸。段志广介绍说体内合成蛋白的时候还会复杂很多,比如胶原蛋白中需要很多羟基化的赖氨酸,要从头合成这样的氨基酸,还需要酶的催化过程,还需要在细胞器里面给它补上一个羟基,...

肠漏以及有助于治疗肠漏的成分

对病原微生物和抗原的抑制作用是由胃、胰腺和胆汁分泌物作用产生的。消化酶,包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和核酸酶,对那些可能来自饮食的病原体发挥屏障作用。健康的肠道菌群能够与病原体竞争营养物质,代谢蛋白质和碳水化合物,并合成维生素。肠道有益菌群还可以产生许多其它代谢产物,参与调节上皮与免疫系统之间的相互作用...

一文读透细胞死亡(Cell Death) | 24年Cell重磅综述(长文收藏版)

线粒体释放的细胞色素c与adaptorAPAF-1相互作用,促进凋亡体复合体的组装,有助于起始caspase,即caspase-9的二聚化和激活。线粒体释放的DIABLO(也称为线粒体衍生的第二凋亡激活因子[SMAC])或HtrA丝氨酸蛋白酶2(HTRA2)阻止X连锁的凋亡蛋白抑制剂(XIAP)对caspase的抑制。虽然C.elegans没有类似BAK或BAX的蛋白,但...

HRV 14 3C蛋白酶在大肠杆菌的融合表达及活性检测

目的:人鼻病毒3C蛋白酶具有酶切物异性强且在低温下仍保持较强酶活性的特点而被用作工具酶(www.e993.com)2024年11月3日。为大量获得3C蛋白酶,以融合形式在大肠杆菌中高效表达3C蛋白酶。方法:将编码HRV143C蛋白酶的cDNA克隆到pGEX4T-1载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,经一步GST亲和层析纯化获得GST-3C,再通过体外酶切实验对GST-3C和...

科研| JACS(IF:16):大肠杆菌蛋白质组中普遍存在不可复性

用8M尿素稀释复性的SNase的CD谱与大肠杆菌重组表达的天然蛋白的CD谱重叠(图2A)。同样,当使用LiP-MS探测复性和天然SNase时,它们会产生一组147种不同的胰蛋白酶和半胰蛋白酶肽(图2B),并且具有显著性(丰度比大于2倍,Welch’t检验的P<0.01)。重要的是,当对掺入大肠杆菌裂解物的SNase进行相同的分析时(图2C...

NBT | 你没听错,利用细菌抗癌——大肠杆菌用于降解c-MYC

接着,研究人员考虑到c-MYC表达水平受到细菌的抑制作用是一个非常快速的过程,而c-MYC蛋白本身的半衰期是30分钟左右,因此他们推测细菌的效应分子可能参与到了c-MYC蛋白的降解过程。研究人员将细菌分泌的上清进行了质谱检测。质谱鉴定结果显示Lon蛋白酶(Lonprotease)在细菌上清中大量富集,提示着Lon蛋白酶可能参与了c-MYC...

化毒为宝:刘如谦/董民团队合作定向进化肉毒素蛋白酶

突变质粒则表达一些提高DNA复制时突变几率的蛋白，在噬菌体DNA复制时引入突变到蛋白酶的基因中。由于这个反应器不断地有新鲜的培养基和大肠杆菌宿主流入，并且有旧的培养基和大肠杆菌流出，只有当一个噬菌体编码的蛋白酶可以激活T7RNA聚合酶产生新的更多的具有感染力的噬菌体的时候，这个噬菌体才能通过不断地感染新...

水稻中一种新的蛋白酶抑制剂基因的扩增

植物蛋白酶抑制剂在植物抵御病虫害中起着重要的作用,本实验通过对水稻蛋白酶抑制剂RBBl28基因进行PCR扩增,加上终止密码子以便在原核体系中进行表达,从而为进一步研究其蛋白产物的功能作好了准备。一、前言蛋白酶抑制剂广泛存在于各种生命体中,例如:在高等动物血液中,每lOOnd血清含有超过200mg的各种抑制剂。在植物...