南京博研生物:人透明质酸(HA)ELISA实验操作错误及避免方法
让试剂在工作台上放置15–20分钟,达到室温。组分存储不正确:仔细检查试剂盒标签上的储存条件。大多数试剂盒需要在2–8°C下储存。试剂过期:确认所有试剂的有效期。请勿使用超过有效期的试剂。试剂添加/制备不正确:检查方案,确保试剂按正确的顺序添加以及准备好进行正确稀释。捕获抗体与板不结合:如果使用即用型...
南京博研生物:人γ干扰素 IFN-γ ELISA试剂盒工作原理详解
以下是该技术的基本步骤和原理:1.**固相抗体包被**:-首先,特定的抗人IFN-γ单克隆或多克隆抗体被包被(固定)在ELISA板的每个微孔中。这个抗体能够特异性识别IFN-γ。2.**样本或标准品的加入**:-然后,将含有未知浓度IFN-γ的样本(如血清、血浆或细胞培养上清液)或一系列已知浓度的标准品加入到包被...
豚鼠球蛋白A1(IgA1)ELISA试剂盒重复性好可定制
ELISA检剂盒应用定性夹心检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM,这些就会与HEV的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特和样品中的其它成份。然后加入羊抗...
ELISA方法学开发实践版3:杂交瘤和噬菌体展示筛选方法开发
取浓度为100ug/ml抗原,室温溶解,混匀用包被液按如下步骤稀释至0.2ug/ml,0.5ug/ml,1ug/ml,按加样布局表加入100ml/孔,分别加入酶标板条中(Note2),其中加入包被液做包被抗体的空白对照,2-8℃过夜。2.用洗涤液洗板3次,拍干,加入300ml/孔封闭液(Note3)室温封闭1小时;洗涤液洗板3次,拍干待用;3....
ELISA法检测抗体的效价
1、包被:将抗原(BSA-Ag偶联物)用包被缓冲液稀释为10ug/ml(视抗原,可1-40ug/ml)左右(预实验中确定最适浓度),加入聚苯乙烯板(0.1ml/孔),加封口膜于4℃过夜(或37℃下,孵育6h)。可包被BSA溶液或只加包被液作为空白对照。2、封闭:弃去孔内液体,每孔加200ul封闭液(近满),37℃湿盒保持6h(或4℃过夜...
免疫PCR(Immuno PCR)原理和改进及扩增产物的ELISA检测
Zhou检测了人原癌基因ETSI,检测浓度可达到9.6×10-15M,是常规ELISA的105倍(www.e993.com)2024年11月9日。与Sano的免疫-PCR系统相比,Ruizicka和Zhou所用的方法不需要特殊的试剂,生物素和亲和素(链亲和素)都已经商品化,因此在实际操作中得到广泛应用[4]。但直接包被待检抗原不适用于临床标本和难以吸附固相抗原的检测。随后在一系列实验中...
生物分析专栏 | PEG修饰药物的药代动力学和生物分析
ELISA法为PEG化药物的分析提供了一种快速、方便的技术,在某些情况下,这是其他方法难以实现的。但是PEG化药物在体内会经历一系列降解和代谢过程,ELISA法只能检测活性药物(与靶标结合),不能有效的对PEG化药物、游离药物分子及PEG基团、代谢产物进行区分,不适合复杂生物基质中PEG化药物的分析。而液质联用法可以检测总...
免疫荧光技术的实验方法及其分类
夹心ELISA法与EIA具有良好的相关性(r=0.92)。ELISA法具有灵敏度高,特异性强,精密度好,操作简单,适用于多份标本的检测,不需特殊仪器设备等优点,易于推广普及。但不适合急诊的快速检测。以双抗法为例。首先包被抗原,然后加入一抗,使一抗与包被抗原形成抗原—抗体复合物。接着加入酶标二抗,形成抗原—抗体—抗体...
...张振锋:丁型肝炎抗体检测方法比较分析|丁型肝炎抗体|ELISA|丁...
间接法ELISA采用HDV抗原包被酶标板,然后与样品孵育捕获抗-HDIgM,最后用酶偶联的抗人IgM抗体进行信号检测。但该方法的样品中可能含有大量的抗-HDIgG也能够与HDV抗原结合,此竞争性结合可能会导致抗-HDIgM的检测结果不准确。因此,采用间接法ELISA检测抗-HDIgM时通常需要对样本进行稀释或者采用吸附法预先去除IgG。
带您近距离了解RSV病毒抗原及抗体试剂
LanZhang及其所在的Merck团队在研究更稳定的RSV融合蛋白疫苗的设计和鉴定过程中,利用义翘神州的RSVF重组蛋白进行WB检测,分析不同变异体亚单位疫苗的表达水平。Lee及其团队在开发安全有效的RSV疫苗研究中,将义翘神州的RSV-G重组蛋白(Cat:40830-V08H)用做ELISA检测的包被抗原,检测血清中RSVA2病毒特异性抗体的滴度。