惨了,因质粒用错,博士被撤稿,痛失学位,导师:我不允许各位重蹈覆辙...

通常,按得到质粒DNA的量可将质粒抽提方法和试剂盒分为小提,中提,大提。做实验严丝合缝地按照步骤执行是严谨的体现,但是有时候也要在不违背主体原则下灵活地改变,例如,在提取质粒时,根据菌液量、实验目的等需要,灵活地选择合适的提取方案,才能获得浓度达标的DNA,有效快速地推进实验。毕竟,DNA浓度直接关系...

性价比超高的质粒DNA转染试剂

首先要考量其转染性能,这是最重要的一方面;其次还要考虑到实验的操作简便性,最好无换液之苦并且不需要购买额外的培养基;最后,对于实验者来说,性价比也是十分重要的衡量标准。能满足以上条件的质粒DNA转染试剂,同时,无论是对于经验不足的“小白”还是转染实验的“高手”;无论是易转的细胞系还是难转的细胞系,都有...

国内首款裸质粒基因治疗新药治疗下肢缺血性疾病Ⅲ期临床试验(静息...

溃疡适应症已于2024年2月率先完成试验,并已于7月份正式获得CDE新药注册申请(NDA)受理,是我国首个申报NDA的裸质粒型基因治疗药物。本次静息痛适应症揭盲后,还需根据方案及统计分析计划的规定开展全面深入分析,并完成临床试验总结报告。公司正同步开展该适应症的新药上市许可申请资料的撰写工作,并将积极与药监部门沟通...

干货| 无内毒,细胞更健康:揭秘质粒纯净抽提新魔法

质粒提取中减少内毒素,可以有效减少质粒转染实验中对细胞的损伤。1)产生细胞毒性:细胞培养或动物实验中,内毒素具有很强的细胞毒性,引起免疫反应,导致细胞凋亡或坏死;2)干扰免疫反应:在免疫学实验中,内毒素能够诱导机体产生强烈的炎症反应,导致体内炎症因子的释放,影响免疫功能研究;3)影响蛋白质稳定表达:在蛋白质纯...

你敢信?实验室质粒可能 50% 都是错的,撤稿风波不断,连博士学位都...

看来,质粒序列出现问题会引发实验失败,不结合实际、不分青红皂白随意使用质粒也会给实验结果造成灭顶之灾。质粒错误只是冰山一角近年来各类论文打假、撤稿屡见不鲜,除了上述提到的质粒污染和错误引发的撤稿,细胞污染、基因组污染同样给人们敲响了警钟。

质粒DNA提取实验常见问题解答

(3)质粒DNA在SolutionII中暴露过久,易造成质粒DNA的切口断裂(www.e993.com)2024年11月6日。裂解步骤控制在5分钟内完成。(4)培养的细菌被杂菌污染。解决方法:重新挑取单菌落培养细菌。5.抽提的质粒DNA电泳时怎么出现基因组DNA的污染?(1)菌体裂解和中和过程中,剧烈混合造成基因组DNA断裂所致。解决方法:温和地进行菌体的裂解和中和。

超螺旋质粒DNA纯化方案 (高质量高纯度质粒的制备)

质粒纯化最好的方案是要有一个稳健有效的整体过程，其中每一步都能得到很好的优化。目前市场上应用比较更广泛的是经典的层析三步法，科诺赛对每一步层析工艺进行了优化，将不同原理的层析纯化技术、合适的层析介质结合在一起，进行了实验应用研究，可保证在高纯度的基础上，工艺更加的稳定及高效。图1.超螺旋质粒...

PCR实验室污染的应急处理方法

在实验操作中会经常用到阳性参考品,这些参考品大多数是由某些克隆质粒制作而成的,质粒在单位容积内浓度高,不小心使用极易造成污染。2、实验室污染处理方法1.物料准备(1)购买喷壶(能够喷出雾状水汽的即可);(2)购买市面上有效氯消毒片,根据要求配置不同浓度的消毒液,或者购买成品次氯酸钠消毒液配制合适浓度消毒...

如何优雅的完成噬菌体的扩增和定量实验?实验汪必备! | 小奥课堂

3.TG1在对数生长期的生长速度是20分钟一代,需要密切关注TG1的生长,及时取菌进行实验。4.辅助噬菌体和TG1的比值MOI在20:1时能够保证所有TG1被感染上。5.含有噬菌粒的噬菌体能够感染正常的TG1大肠杆菌,并将噬菌粒留在TG1中并随着TG1的扩增进行扩增,在无辅助噬菌体的情况下无噬菌体的扩增。

核酸提取干货 - MedChemExpress

我不仅包含蛋白酶K,更有核酸助沉剂助力,提取的核酸那可不团团来嘛!纯化的病毒DNA/RNA可用于PCR、RT-PCR、qPCR等实验。Kitthree(质粒大量抽提试剂盒):我适用于从≤500mLLB培养基培养的大肠杆菌细胞中高效的提取质粒DNA。RNaseA可对RNA进行清除,柱上去除内毒素,Verygood!MCE新上线核酸...