测定蛋白质等电点:了解分析原理与实验方法的必备指南
等电点的定义:等电点是蛋白质溶液中净电荷为零的pH值,即带正电荷的氨基酸残基和带负电荷的氨基酸残基在该pH值下几乎相等。二、测定蛋白质等电点的方法等电聚焦电泳(IEF):利用电场将蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中分离,根据其在电场中迁移的速率确定等电点。等电点电泳(IPG):使用具有梯度pH值的聚丙烯酰胺凝胶,将...
藜麦蛋白、大米蛋白等6种植物类蛋白的功能特性汇总
溶解性表现的是蛋白质在水相中的分散能力,且pH对藜麦蛋白的溶解性有较大影响。藜麦蛋白在酸性条件下溶解度较低,这与11S球蛋白的等电点在4~5左右有关。在碱性条件下,藜麦蛋白溶解度显著提高。Mir等研究发现藜麦蛋白溶解度从60.22%(pH9)升高到75.34%(pH10),再降低到70.78%(pH12)。这是由...
《食品科学》:安徽科技学院甄宗圆副教授等:蛋白添加剂增强肉制品...
蛋白质含量是凝胶能否形成的关键因素,蛋白质量分数在8%以上才能形成硬质凝胶,而低于8%时仅加热不能形成凝胶,但是通过改变离子强度、pH值、改性等手段可以使大豆分离蛋白形成凝胶的浓度发生改变。此外,在大豆分离蛋白中加入不同类型和含量的脂质,添加的脂质作为蛋白凝胶的填充颗粒,会与蛋白质聚集体发生相互作用,促进蛋白...
色谱法详解|基质|液相|离子|分析物|毛细管_网易订阅
毛细管凝胶电泳(CGE)广泛用于蛋白质和核酸的分离。凝胶网络充当筛网,根据大小分离成分。毛细管等电聚焦(CIEF)根据分析物的等电点进行分离,并包含pH梯度。该技术常用于蛋白质的分离。毛细管等速电泳(CITP)利用两种缓冲系统的组合,有时用作其他CE技术的预浓缩方法。CE被视为液相色谱(LC)的替代方法,尽管CE尚未像LC那样...
【文末互动送礼】关于Biacore你最关心的问题-精选篇
(1)可以使用PHScouting进行测试,将配体稀释于不同pH的10mM醋酸钠缓冲液中,流经空白的芯片表面,测试静电吸附的效果。此时,配体蛋白并没有真正偶联在芯片上,使用NaOH可以清洗芯片表面,然后做正式配体偶联。(2)醋酸钠的PH应大于3.5,并小于蛋白的等电点,使蛋白带正电以方便和带有负电的葡聚糖偶联。
大规模设备更新:中等职业学校生物化工专业实训教学设备要求
4.溶液的配制;5.元素化合物的性质;6.无机化合物的制备与提纯;7.酸、碱溶液的标定;8.物质含量的测定;9.固液分离;10.溶液pH测定基础化学化学实验技术天平实训室301.物质直接称量法训练;2.物质减量称量法训练;3.物质增量称量法训练基础化学...
一文整理,检验科各类胶体金检测注意事项、假阳/阴性原因...建议...
胶体金标记是将蛋白质等高分子物质吸附到胶体金颗粒表面。在溶液pH接近蛋白质的等电点或偏碱性条件下,金颗粒表面的负电荷与蛋白质表面带正电荷的基团因静电吸附而牢固结合,用肉眼便可以看到颜色,并且不会使生物大分子变性,因此胶体金是很好的标记物。03...
抗体药物质量和成本遇瓶颈:下游分离纯化技术明显滞后
由于蛋白类生物分子是由氨基酸组成,几乎都带有电荷,因此蛋白分子在不同pH条件下其带电状况不同,当pH等于蛋白的等电点时,蛋白处于电中性,当pH小于等电点时,蛋白带正电荷,当pH大于等电点时,蛋白带负电。不同生物分子带的表面电荷正负性质及表面电荷数量不同而且会随着流动相的pH改变而改变,使得不同组份的...
pH值处理对黑豆分离蛋白结构、流变特性及乳化性能的影响
表观黏度的变化规律与乳化活性及乳化稳定性大体一致,即远离等电点均呈现上升趋势。在pH3时表观黏度大于pH2条件下的蛋白溶液,可能是因为该条件处理BBPI导致疏水基团暴露较多,蛋白间形成了三维网状结构,降低了流动性,即蛋白质分子之间的连接更加紧密,表观黏度增大。
聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测蛋白质的等电点
等电点标准蛋白(pH3-pH10)试剂盒,临用前稀释至0.1-0.3mg/mL。适合于pH3-pH10范围的电极溶液:A:阴极电极溶液(1mol/LNaOH):称NaOH(AR)4g,加去离子水使其溶解,冷却至室温再定容至100ml;B:阳极电极溶液(1mol/LH3PO4):取H3PO4(85%)6.7ml,加去离子水定容至100ml。