测定蛋白质等电点:了解分析原理与实验方法的必备指南
等电聚焦电泳(IEF):利用电场将蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中分离,根据其在电场中迁移的速率确定等电点。等电点电泳(IPG):使用具有梯度pH值的聚丙烯酰胺凝胶,将蛋白质根据等电点在凝胶中定位。pH梯度电泳:通过在凝胶中创建pH值梯度,使蛋白质在凝胶中以等电点静止。三、蛋白质等电点分析的应用和局限性蛋白质溶解...
【文末互动送礼】关于Biacore你最关心的问题-精选篇
(1)可以使用PHScouting进行测试,将配体稀释于不同pH的10mM醋酸钠缓冲液中,流经空白的芯片表面,测试静电吸附的效果。此时,配体蛋白并没有真正偶联在芯片上,使用NaOH可以清洗芯片表面,然后做正式配体偶联。(2)醋酸钠的PH应大于3.5,并小于蛋白的等电点,使蛋白带正电以方便和带有负电的葡聚糖偶联。(3)在达到预定...
南京大学2024、2023年强基计划笔试面试试题
氧化还原法:利用强氧化剂或还原剂,将有害物质转化为无害或易于去除的物质。吸附法:使用活性炭等吸附材料,将溶解在水中的污染物吸附到固体表面。电化学处理:通过电解氧化或还原污染物,从而净化水质。光催化:利用光催化剂在光照下产生强氧化性的自由基,分解水中的有机污染物。这些方法各有优缺点,应根据具体的...
《食品科学》:南阳师范学院唐存多副教授等:大肠杆菌L-苏氨酸脱氢...
将上述推测出的EcTDH氨基酸序列在ProtParam(httpsweb.expasy/protparam/)上进行理论理化性质的预测,结果表明,EcTDH的理论等电点为5.81,理论分子质量为37173.94Da,不稳定指数II为24.46,是一个较稳定的蛋白,其在E.coli和酵母体内的半衰期分别能达到10h和20h以上。利用TMHMM-2.0服务器预测蛋白跨膜结构...
抗体药物质量和成本遇瓶颈:下游分离纯化技术明显滞后
很多情况下,只要介质在使用pH范围,也就是在离子状态,蛋白质的带电性质和电荷多少是影响蛋白质吸附量的决定因素。另外,蛋白质样品一般要求在分离后保留生物活性,而保留蛋白质活性需要一个合适的pH值。所以选择离子交换分离纯化生物分子时,要综合考虑样品组分的等电点、蛋白质稳定的pH范围和交换基团离解范围选择交换...
《食品科学》:青岛农业大学陈海华教授等:热诱导温度与pH值对乳清...
1、pH值对WPC溶液α的影响如图1所示,pH值的降低使WPC的|α|先减小后增大,pH4.5时,α=0(www.e993.com)2024年9月19日。Bo??i??等发现,β-乳球蛋白的净电荷会随环境pH值的变化而变化。Ako等发现电荷斥力在等电点(pI)处最小,改变pH值可使豌豆蛋白和β-乳球蛋白更接近α=0的等电点。这可能是因为pH值能改变蛋白质构象,进而改变蛋白...
pH值处理对黑豆分离蛋白结构、流变特性及乳化性能的影响
东北农业大学食品学院的曾琪、胡淼、齐宝坤*和江连洲*等人采用不同pH值条件处理BBPI后调节回中性条件,研究pH值对蛋白质的功能性质、流变性、乳化性的影响以及与稳定乳液的相互关系,使黑豆的资源能够得到更好的发掘。1溶解性与表面疏水性由图1可知,BBPI的等电点在pH4.0~5.0之间,表面疏水性在远离等电点的...
科研| Water Research:利用等电点预处理以强化剩余污泥在厌氧条件...
本研究通过污泥界面热力学、电子传递和微生物群落的研究,揭示了等电点(pI)预处理对甲烷产率的增强作用。实验结果表明,经pI预处理后,产甲烷潜力、最大产甲烷速率和沼气中最大甲烷占比分别提高了122.2%、154.4%和17.4%,表明pI预处理提高了甲烷的产效率。在170天的产甲烷发酵周期内,分析了pI处理前后,污泥固液界面非...
聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测蛋白质的等电点
但某些蛋白质在等电点附近,或水溶液及低盐溶液中,溶解度较低,則可在样品中加入两性电解质,如加入1%甘氨酸或对1%甘氨酸透析,虽然甘氨酸是两性电解质,但不影响pH梯度的形成,可利用其在溶液中的偶极距作用增加蛋白質的溶解性。此外,还可在样品及凝胶溶液中加入无离子去污剂如Tween80,TritonX-100,NonideP-...
pH值偏移处理对油莎豆蛋白结构及乳化性质的影响
这可能是因为在等电点附近,蛋白质溶解度降低,蛋白分子发生聚集,疏水基团被包裹在分子内部,影响乳化的进行,从而导致蛋白质EAI的降低。碱性环境中随pH值增加,蛋白质EAI也逐渐增加,这可能是因为pH值升高,颗粒尺寸变小,蛋白结构展开,原本包裹在蛋白分子内部的疏水基团暴露出来,增强其表面活性,导致蛋白EAI升高。