谢国明教授:智能分子诊断领域的创新二重奏!
ASLM的变构设计可以在不牺牲DNA放大电路的兼容性的同时,最小化背景信号,从而提高传感检测的灵敏度。通过在HCR发夹(H1和H3)内设计MNAzyme亚基,并在H3的5'端引入阻断结构域,可以在没有目标分子的情况下抑制非特异性结合。并通过PAGE分析,展示了aHCR系统的高效率运行。在证明了aHCR令人满意的扩增效率后,该研究...
他,从工业界回到学术界,36岁获国家杰青资助!|细胞|介导|单链|核酸...
最后,在合成和临床样本上验证了基于DNA的计算的性能,其中包括血清中的miRNA扩增,将扩增的线性单链DNA转化为环状DNA以获得更多的序列正交性,以及通过权重乘法、求和和和减法进行DNA计算,然后进行信号报告。研究使用22名健康人(8人)和癌症患者(14人)的临床血清样本成功实现了快速准确的癌症诊断,准确率为86.4%。研究设想...
qPCR 数据怎么算?一个万能公式带你搞定
PCR反应的效率:PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所产生斜率不同的标准曲线。PCR效率取决于实验、反应混合液性能和样品质量。一般说来,反应效率在90~110%之间都是可以接受的。无Ct值出现怎么办?检测荧光信号的步骤有...
干货| CT值大原因速查,qPCR 实验优化三步走
将基因扩增产物进行梯度稀释(至少三个梯度)同时进行qPCR,得到的CT值仪器会自动拟合标准曲线,或将CT值导入Excel中手动绘制标准曲线,将标准曲线中的斜率带入引物扩增效率的计算公式:e=10[??1/k]-1(e:扩增效率,k:斜率)C试剂不同qPCR试剂中的Taq酶、Buffer、Mg2+、荧光染料等成分配比不同,...
那么问题来了,qPCR又是什么?
此公式用于计算待测样本与对照样本之间目的基因表达量的倍数变化,若F值=a(a>1),则代表待测样本相对于对照样本表达量上调a倍;反之若F值=b(1>b>0),则代表待测样本相对于对照样本表达量下调1/b倍。注:2-△△CT法需保证目的基因和内参基因的扩增效率基本一致才能使用。可通过查看扩增曲线中指数增长期是否平行...
qPCR结果异常原因分析及解决方案|探针|荧光|信号|扩增|引物|qpcr...
通过标准曲线可以得到线性方程,将线性方程得到的斜率(K)带入扩增效率计算公式中:e=10[-1/k]-1;只有当扩增效率满足90~120%,且标准曲线R2≥0.99,引物的扩增效率才是合格的,定量出来的Ct值才可以用来计算,且扩增效率越接近100%,引物的扩增性能越优;若判断为扩增效率较低,主要为反应条件不适宜或者引物设计不...