qPCR 曲线「丑」到拿不出手!除了引物,这些问题也要注意
应注意提高模板浓度,降低退火温度等优化反应程序。Ct值过低:可能是模板浓度高,引物设计不合适。因此应减少模板量或稀释cDNA,优化程序避免非特异性扩增。CT值重复性差:仪器、试剂、耗材、实验操作细节等众多因素,具体问题具体分析。3.qPCR扩增曲线异常:正常扩增曲线应呈平滑S型。常见异常包括扩增曲线锯齿...
指南共识丨纳米孔测序在病原微生物检测中的应用专家共识
而tNGS的片段长度取决于待测微生物引物设计时的引物扩增子长度。例如,病毒等基因组较小的微生物,在测序过程中更容易碎裂成短的片段(100bp左右),所以引物扩增子需要设计得更短一些,进而导致测序片段也较短。因此,扩增子长度会直接影响序列长度,通常序列长度要求不小于最短扩增子长度。5.4参考数据库比对及物种鉴定...
最高人民法院知识产权案件法律适用问题年度报告(2023)摘要
当具有差异的数值或者数值范围系以基本相同的技术手段,实现实质相同的功能,达到实质相同的效果,且本领域技术人员无需经过创造性劳动就能够联想到;同时,综合考虑技术领域、发明类型、权利要求修改内容等相关因素,认定有关技术特征等同既不违背社会公众对权利要求保护范围的合理期待,又可以公平保护专利权的,可以认定构成等同...
qPCR 曲线杂乱、重复性差?你可能忽略了这些点(含福利)
直播内容抢先看:1.如何设计「好」引物?qPCR引物设计原则及注意点:引物设计跨内含子(防止非特异性扩增),注意不同转录本之间的差异,扩增效率在90~110%之间,引物特异性验证(Primer-Blast序列比对及溶解曲线分析);2.CT值异常分析:Ct值过大:可能是模板浓度低,扩增效率低或者体系存在PCR抑制物。应注意提...
最高人民法院知识产权法庭裁判要旨摘要(2023)
权利要求中限定的某些内容如给药特征,虽然在新颖性、创造性判断中可能因不具有实质限定作用而不予考虑,但在优先权审查中应予考虑。7.补充实验数据的接受案号(2019)最高法知行终33号裁判要旨药品专利申请人或者权利人在申请日后提交补充实验数据,主张该数据能够证明专利申请或者专利具备创造性、专利权利...
北京发现2例猴痘病例,《猴痘防控技术指南》等内容汇总学习
若在国内外有可疑动物、人员或猴痘病例接触史,出现发热、皮疹等症状,应及时到正规医院就诊,一般可以选择皮肤科,并告知医生流行病学史,结痂前避免和他人密切接触(www.e993.com)2024年10月1日。猴痘防控指南和诊疗指南猴痘重点内容和防控知识汇总,包括《猴痘防控技术指南(2022年版)》和《猴痘诊疗指南(2022年版)》等内容。
...国农业农村部公告 第342号(兽医诊断制品注册分类及注册资料要求)
为进一步提高兽医诊断制品研制积极性,促进商业化生产和应用,提高制品质量,进一步满足动物疫病诊断和监测等工作需要,我部组织修订了《兽医诊断制品注册分类及注册资料要求》,现予发布,自2020年10月15日起施行,并就有关事项公告如下。一、纳入兽药注册管理的兽医诊断制品仅指用于动物疫病诊断或免疫监测的诊断制品。
RT-PCR知多少,有这一篇就够了
RT-PCR引物设计原则1.上下游引物要保守:扩增子长度需选择一段保守片段(100-200bp)进行PCR扩增,选择片段需跨越内含子,因内含子的基因组DNA序列不会被扩增,也可减少从污染的基因组DNA中扩增得到的假阳性风险。引物选取同样需要保守。2.引物长度和Tm值:引物设计长度为18-25bp,Tm值在50-65℃之间,引物中GC...
《兽医诊断制品试验研究技术指导原则(征求意见稿)》| 中国兽医...
1目的为兽医诊断制品的研制提供原则性指导。2背景根据《兽药管理条例》中的有关规定,兽医诊断制品属于兽药。兽医诊断制品的申报和审批程序,与预防和治疗类兽用生物制品相似。但是,兽医诊断制品的研制内容和申报资料项目要求仍具有其特殊性。3兽医诊断制品的主要技术指标...
明确了猴痘患者的隔离治疗管理可以居家;明确医务人员的防护设备...
一、总体要求坚持“预防为主、防治结合、精准防控、快速处置”原则,落实“早发现、早报告、早隔离、早治疗”措施。开展医疗机构、重点人群、入境人员和重点场所等多渠道监测。加强疫情分析与风险研判,有针对性地开展重点人群健康教育和综合干预。落实病例隔离治疗、流行病学调查和密切接触者追踪管理等措施。坚持发现一起...