Nat Chem:陈加余团队系统揭示三链体DNA互作蛋白调控机制与功能...
通过体外解旋酶实验,作者发现DDX3X能够以不依赖ATP的方式解旋三链体DNA,并且尤其偏好第三链5′端存在额外单链DNA(5′overhang)的三链体DNA。据作者了解,DDX3X是迄今为止发现的唯一一个ATP非依赖的三链体DNA解旋酶。进一步的免疫荧光实验显示,DDX3X缺失会导致三链体DNA的累积并诱发DNA损伤。通过CUT&Tag实验,作者...
组织蛋白酶K参与扰动动脉粥样硬化依赖于整合素-细胞骨架-NF-κB
组织蛋白酶K(CTSK)是肽酶C1家族溶酶体半胱氨酸蛋白酶中最有效的蛋白酶之一,被证实参与动脉粥样硬化过程中ECM的重新分布。最近,CTSK在人动脉粥样硬化病变的内皮细胞、巨噬细胞和血管平滑肌细胞中表达。已发现CTSK受氧化型LDL(OxLDL)、细胞因子和振荡剪切应力的调控。然而,血流动力学如何传递和调控CTSK表达的分子机制...
18项抗核抗体谱检测的临床意义|抗原|免疫|滴度|特异性_网易订阅
应用IIF检测ANA,在判断荧光染色模型时一定要注意有丝分裂期的细胞,其中期细胞荧光染色特点对核型判断具有重要意义。免疫印迹法该法亦称酶联免疫电转移印斑法(EIBT),是随着分子生物学和免疫学的兴起而逐渐发展建立起来的一种免疫化学技术,最早应用于DNA和RNA的检测鉴定。该方法是将经SDS-PAGE电泳分离的蛋...
国内常见多种狂犬病毒株,如何预防?新型PIKA佐剂疫苗,可能是潜在的...
分别于注射后8、24h取血清,Luminex多重分析法检测细胞因子的表达。(a)细胞因子在血清中表达的热图可视化。细胞因子按行表示,样本按列表示。为了考虑细胞因子表达的变化,通过将最小浓度设置为0和最大浓度设置为1来归一化数据,并按行组织。检测(b)血清干扰素-α、(c)白介素6和(d)CXCL1水平。每组6人。平...
iMeta | 齐素华/顾兵/罗兰/王亮-揭示玛咖来源细胞外囊泡可通过脑...
使用广泛用于标记EVs的亲脂性荧光染料Dil来表征和监测Mca‐EVs的细胞摄取或组织分布。体内成像显示,Dil‐Maca‐EVs可有效穿过血脑屏障,并在小鼠脑内具有更高的荧光密度(图1E,F)。此外,除了对蔗糖偏好的调节外,我们还通过行为测试(如悬尾测试、强迫游泳测试、开旷场地测试和蔗糖消耗测试)证明了Maca‐EVs对抑郁症...
DNS损伤修复实验|高通量筛选服务|酶学靶点筛选|细胞活性检测实验
PARP(PolyADP-ribosepolymerase)全称为多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶,是一种DNA修复酶,在DNA损伤修复、维持基因组稳定性方面起着重要作用(www.e993.com)2024年11月23日。PARP家族共有17个成员,其中,PARP1是最主要的成员,其在细胞中承担着PARP家族90%以上的功能,是DNA损伤修复中的关键作用因子。PARP主要是通过与DNA损伤位点相结合(大多为单链DNA断裂...
Nat Chem | 陈加余团队系统揭示三链体DNA互作蛋白调控机制与功能...
最后,作者以新发现的三链体DNA调控蛋白DDX3X为例,进行了深入的分子机制研究。通过体外解旋酶实验,作者发现DDX3X能够以不依赖ATP的方式解旋三链体DNA,并且尤其偏好第三链5′端存在额外单链DNA(5′overhang)的三链体DNA。据作者了解,DDX3X是迄今为止发现的唯一一个ATP非依赖的三链体DNA解旋酶。进一步的免疫荧光实...
Nature重磅综述 |关于RNA-seq,你想知道的都在这
RNA-seq方法源于早期的表达序列标签(expressed-sequencetag)和表达芯片技术,最初用于分析多聚腺苷酸化的转录本。但是,二代测序的应用发现了这些方法的局限性,虽然在表达芯片中并不明显。因此,在RNA-seq技术首次发表后不久,许多文库制备方法的改进相继推出。例如,片段化RNA而非cDNA可以降低3'/5'偏好,链特异性文库...
OXY-TOUCH荧光法残氧仪可用于肠道厌氧菌和人结肠上皮的培养系统
用热杀灭或培养的青少年双歧杆菌上清液预处理四个独立的人结肠上皮细胞24小时。(J)重复(E)的实验。进行定量逆转录酶聚合酶链反应分析,以确定肠上皮相关基因在不同类器官系中对活细菌的反应的信使RNA表达。数据以平均值±标准差表示。单因素方差分析的P值:[gf]2217[/gf][gf]2217[/gf][gf]2217[/gf]...
郑磊教授:基于细胞外囊泡的生物学技术及治疗方法研究前沿
使用定量PCR检测了细胞和EVs中miR-92a-1-5p的过表达。通过Trap染色、成骨细胞标记物ctsk和trap的mRNA表达、CTSK和TRAP的免疫标记以及体外和体内微CT等实验评估了骨吸收细胞的功能。通过双荧光素酶报告基因系统证实了miR-92a-1-5p的靶基因。设计siRNA并通过瞬时表达来确定下游基因对骨吸收细胞分化的作用。