PCR异常扩增曲线原因及案例分析
耗材对于荧光定量PCR来说比较重要,很多异常的扩增曲线是由于耗材使用不当引起的。常见的耗材相关问题包括:1)错误使用成普通PCR仪器所对应的耗材普通PCR耗材一般透光度比较差,会造成荧光扩增曲线异常,比如打折的扩增曲线(图三)。图三:错误使用普通PCR耗材的结果2)未选择跟仪器加热模块规格匹配的耗材荧光定量PCR...
大规模新冠核酸筛查中出现的异常扩增曲线分析
曲线呈现出不典型的“S”型,有极短的对数扩增上升期,后进入平台期,荧光强度高于阈值,但远低于正常扩增曲线荧光强度,多见于顶部采光的PCR仪。02原因分析:该类型曲线可能为使用的PCR反应板封膜在PCR过程中受到水蒸气的影响产生变形,引起“光学扭曲”现象;也有可能是反应液中有气泡,气泡可以让光路发生折射,在气泡...
如何解析新冠核酸检测中的异常扩增曲线?
(1)软件在进行基线自动扣除的时候出现错误,引起了扩增曲线抬升。(2)选用的耗材、试剂或者操作的原因导致背景荧光信号有所波动,造成反应孔的自动基线扣除错误。(3)探针浓度过高,体系中有荧光物质污染,扩增效率低。解决方案:(1)采取手动调整基线的方法,重新定义基线即可正常(即将基线起点改为荧光信号稳定的循环数,...
《猴痘防控方案》印发
不明原因急性皮疹(面部或口腔黏膜、四肢、生殖器或会阴、肛周等部位),伴发热(>37.3℃)或淋巴结肿大者。2.疑似病例。猴痘样症状者,发病前21天内具备以下流行病学史中的任何一项:(1)有猴痘病例报告地区旅居史;(2)有猴痘确诊病例或疑似病例接触史;(3)有同性性行为,或性伴有同性性行为史;(4)有地方性流行区可...
国家疾控局印发猴痘防控方案:密接者需进行21天健康监测
1。传染源。猴痘病毒的宿主尚不明确,目前认为非洲啮齿类动物(非洲松鼠、树松鼠、冈比亚袋鼠、睡鼠等)可能为其自然宿主。传染源包括猴痘病例及感染的啮齿类动物、猴和猿等灵长类动物。2。传播途径。猴痘病毒主要经黏膜和破损皮肤侵入人体,主要通过直接接触病例的病变皮肤或黏膜传播,亦可通过接触被病毒污染的物品、长时间...
关于印发猴痘防控方案的通知
1.传染源(www.e993.com)2024年10月23日。猴痘病毒的宿主尚不明确,目前认为非洲啮齿类动物(非洲松鼠、树松鼠、冈比亚袋鼠、睡鼠等)可能为其自然宿主。传染源包括猴痘病例及感染的啮齿类动物、猴和猿等灵长类动物。2.传播途径。猴痘病毒主要经黏膜和破损皮肤侵入人体,主要通过直接接触病例的病变皮肤或黏膜传播,亦可通过接触被病毒污染的物品、长时间近...
qPCR体系优化和常见问题分析
过低的扩增效率(<90%)可能存在的原因:??移液器校准不良或移液技术差。??不正确的稀释导致标准曲线出现错误。??引物设计不好或扩增子具有二级结构。??标准曲线动态范围太小。??Taq酶无活性或活性降低。??样品抑制。过高的扩增效率(>110%)可能存在的原因:...
丁翠敏:NSCLC分子学检测现状与罕见靶点治疗进展
绝大多数细胞学样本均可用于分子学检测,但依赖于样本中肿瘤细胞的绝对数(>100个)、所占比例、保存的程度,以及检测方法的敏感性。如果要进行分子学检测,建议平均抽吸活检4次。细胞团块和核心组织样本更适于基因突变分析和ALK检测;如负荷不足,可选用细胞学玻片来检测EGFR等基因突变。ROSE有助于评估靶病灶样本中肿瘤细胞...
国家疾控局:猴痘密接者需进行21天健康监测
1.传染源。猴痘病毒的宿主尚不明确,目前认为非洲啮齿类动物(非洲松鼠、树松鼠、冈比亚袋鼠、睡鼠等)可能为其自然宿主。传染源包括猴痘病例及感染的啮齿类动物、猴和猿等灵长类动物。2.传播途径。猴痘病毒主要经黏膜和破损皮肤侵入人体,主要通过直接接触病例的病变皮肤或黏膜传播,亦可通过接触被病毒污染的物品、长时间近...