气死!老板说做完克隆就放假,我两眼一睁就是 p,却颗粒无收

复孔重复性差可能是加样操作的问题;而基因克隆需要用高保真酶来确保扩增片段的准确性,常规的DNA聚合酶达不到这么高的要求。师姐可以试一下我最近免费申请的即用型超保真PCR预混试剂,使用时只需加入DNA模板和引物,最大限度地减少人为误差,而且可以确保扩增片段的准确性!师姐为了给广大科研用户的实验保...

服务全球2万+客户、近百亿碱基合成经验,这家企业致力成为合成生物...

在合成工艺方面,AlphaGS的基因合成引物拼接PCR工艺通过专有HiFiGSMix试剂,结合标准化PCR扩增程序设计,使基因合成引物拼接成功率拼接长度提高数倍;其基因合成片段与载体克隆工艺则是通过专利的同源重组Syno??AssemblyMix试剂与高通量转化工艺,可使基因克隆效率与通量整体提高10倍以上。泓迅生物公布的数据显示,自2018...

学术大爆发!中国/华人学者一天发表35篇Nature Communications|...

8.引物酶促进同一模板链上转录和复制之间的竞争,导致DNA损伤转录-复制冲突(TRCs),特别是HO-TRCs可以引入R-环和DNA损伤,然而,潜在的机制仍然很大程度上不清楚。一种叶绿体定位的RNaseH1蛋白AtRNH1C,它可以去除R环并放松HO-TRCs以保持基因组的完整性。2024年1月2日,清华大学孙前文团队在NatureCommunications在线发...

堪称分子生物学界的「瑞士军刀」,这款工具分分钟带你成为大佬

设计引物不用自己想,交给SnapGene一键生成首先需要准备表达载体序列与目的基因序列。(可以从NCBI、文献等进行搜索)在此,学霸君以大肠杆菌蛋白表达载体pet28a和目的基因序列hyg为例:用SnapGene打开表达载体pET28a的质粒图谱。根据实验将使用的无缝克隆试剂以及技术选择相应的选项,以In-Fusion为例。

功能基因克隆的基本策略与引物设计原则

2引物设计基本原则细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物只跟目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会扩增出其他非目的序列。下面的指导描述了一个可以增加特异性引物所具有的令人满意的特点:①典型的引物长18-24bp。引物足够长,保证序列特异性,并降低序列存在于非目的序列...

PCR 引物设计图文详解,一看就会

值得一提的是,各种模板的引物设计难度不一(www.e993.com)2024年11月18日。有的模板本身条件比较困难,例如GC含量偏高或偏低,导致找不到各种指标都十分合适的引物;用作克隆目的的PCR,因为产物序列相对固定,引物设计的选择自由度较低。在这种情况只能退而求其次,尽量去满足条件。做RealTime时,用于SYBRGreenI法时的一对引物与一般PCR的引物,在...

国家药监局器审中心|新冠核酸、抗体、抗原检测试剂注册审查指导原则

本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定,随着法规和标准的不断完善,以及科学技术的不断发展,相关内容也将适时进行调整。一、适用范围新型冠状病毒(2019-nCoV)属于β属冠状病毒,有包膜,颗粒呈圆形或椭圆形,直径约为60~140nm。具有5个必需基因,分别针对核蛋白(N)、病毒包膜(E)、基质蛋白(M)和...

snapgene(引物设计软件)下载 v1.1.3官方版

??使用您自己的引物模拟标准PCR,或允许SnapGene自动设计它们??专门的克隆工具可确保所有主要分子克隆的快速准确构建设计技术限制性克隆限制性克隆是一种常用的克隆技术,其中使用限制性酶来制备插入片段和用于连接的载体。Gateway??克隆质粒可以在没有限制酶的情况下使用Gateway克隆构建,通过重组插入...

RACE专题 | 掌握这些tips,RACE实验顺风又顺水!

②巢氏PCR与RACE结合可以提高克隆的准确度(RACE产物进行巢式PCR时,其固定接头巢式引物为NestedPrimer);③可设计多轮巢式引物进行巢式PCR扩增。NGSP(巢式基因特异性引物)设计原则①引物长度、GC含量、Tm值:同GSP(基因特异性引物)设计原则;②位置:NGSP须设计在GSP的3'端,建议NGSP的5'末端与GSP的3'末端...

中国碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌感染诊治与防控专家共识

(一)CRE感染的抗菌治疗原则(1)临床无菌标本分离到CRE,多为致病菌,病死率高,应及时给予有效的抗菌治疗,如为血流感染,应尽力寻找、积极处理感染源。如为非无菌体液分离到CRE需区分定植还是感染[8]。(2)抗感染治疗包括单药治疗和联合治疗,由于CRE有效治疗药物有限,应尽可能根据药敏结果结合感染部位选择抗菌治疗方案...