中山大学李轩教授团队:揭示肿瘤联合治疗新策略
为了揭示合成致死的潜在机制,研究人员检测了细胞在MDM2i/ULK1耗竭后GSDMs的mRNA表达。研究结果表明,APG-115诱导的p53激活仅显著增加了GSDME的表达水平,而对其他任何GSDM均未观察到类似效应。另外,蛋白质免疫印迹实验分析显示,ULK1敲除增强了GSDME的切割,而GSDMD的切割未显示出显著激活。总之,这些结果表明,p53和ULK1可通...
Western blot整膜和未裁剪膜长什么样还不清楚?
蛋白印迹(WB)是一种基于抗体的实验技术,用于检测和定量靶蛋白,靶蛋白通常在从细胞或组织中提取的复杂混合物中。虽然有许多新的替代技术,如酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光和质谱(MS),但在一定程度上都有一定的局限性。ELISA缺乏加载控制,免疫荧光是一种原位技术,是半定量,而质谱昂贵,取决于实验技术和条件。因此...
热点剖析:RNA 修饰-m7G 发生机制及研究方法
WesternBlot的条带黑度反映蛋白的相对量,数值则提供了量化的比较。检查内参蛋白表达稳定性:GAPDH和U6通常用作内参,确保实验中蛋白质加载量的一致性。对比GAPDH和U6的表达稳定性来判断实验的可靠性。例如,Huh7细胞中GAPDH在Par和LR之间表达变化不大,而U6表达在LR中略有下降。PLC/PRF...
解密蛋白鉴定:探索生物药物中蛋白质的多样性与功能的关键工具
蛋白鉴定是指通过实验方法和技术,确定样品中存在的蛋白质的身份、数量、结构和功能等信息。二、蛋白鉴定的方法与技术1.质谱法(MassSpectrometry,MS):质谱法是蛋白鉴定中最常用且最强大的技术之一。它基于蛋白质分子的质量-电荷比,通过将蛋白质分子离子化,并在质谱仪中进行分析和检测。质谱法可提供高灵敏度、...
你会买全自动Western Blot印迹处理系统么?
全自动WesternBlot印迹处理系统也叫全自动化蛋白杂交系统、全自动蛋白印迹工作站、自动化WB杂交系统、全自动蛋白印迹系统……它实现了对繁琐耗时的蛋白印迹膜的孵育和洗涤过程的自动化。在蛋白被转移到杂交膜上之后,可将杂交膜装载到该系统进行自动封闭、孵育和洗涤。实验人员仅需要准备相应体积的试剂,启动免疫杂交流程...
自身抗体检测在自身免疫病中的临床应用专家建议
常用的检测方法为ELISA(www.e993.com)2024年9月7日。2.1.5抗C1q抗体抗C1q抗体除与低补体血症荨麻疹性血管炎、RA等相关外,与SLE患者并发LN及其活动性也密切相关。常用的检测方法是ELISA。tips:此处的LN是指狼疮性肾炎2.1.6抗磷脂抗体谱抗磷脂抗体谱主要包括狼疮抗凝物(LA)、抗心磷脂(CL)抗体、抗β2糖蛋白I(β2GPI)抗体、抗凝血...
河南工业大学布冠好教授等:大豆主要致敏蛋白及其检测技术研究进展
免疫印迹法又称蛋白质印迹法,是基于抗体的特异性来鉴定抗原的有效检测方法。首先进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),随后将聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白质样品电转移至聚偏二氟乙烯膜(PVDF)上。利用一抗作为“探针”,用标记的二抗进行“显色”,对样品进行检测与分析,免疫印迹法的具体步骤及原理如图6所示。
深入探究co-ip实验:从原理到应用的全面解析
(1)细胞裂解和蛋白质提取;(2)抗体与目标蛋白结合形成免疫复合物;(3)将免疫复合物与亲和基质(如蛋白A/G琼脂糖珠)结合,实现蛋白质的富集;(4)洗涤和洗脱,去除非特异性结合的蛋白质;(5)蛋白质分析,如免疫印迹、质谱等。2.co-ip实验的步骤详解...
人早期胚胎发育的表观遗传调控(染色质组蛋白修饰+DNA甲基化
植入前胚胎发育过程中PMD、启动子和远端调控元件(包括增强子)的组蛋白修饰。同一胚胎细胞在Pre-EGA和Post-EGA期的染色质可及性在管家基因中的变化,这些基因在Pre-EGA均匀可及,在Post-EGA表现出高表达;在发育基因中,这些基因在Pre-EGA不可及,在Post-EGA表现出不同水平的可及性和表达。
解析R848结合流感疫苗的偶联剂依赖效应:对APC激活及体内免疫原性...
7.SDS-PAGE和免疫印迹分析第6天在48孔板中过夜培养人MODC细胞;第7天刺激细胞45、90、135或180分钟。用含有蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞,使用BCA蛋白分析试剂盒评估蛋白质浓度,用凝胶电泳法分离蛋白质样品,将蛋白质转移到PVDF膜上,在4℃下与药物一起孵育过夜。洗涤膜与抗体结合,使用ECLWesternblotting底物...