实验室最不稳定的是什么?RNA 和我提取失败后的情绪

在RNA提取过程中,提高RNA产量和质量的最佳方法是保证样品完全裂解。然而,不用的样本需要针对性的设置裂解方案。例如,血细胞(如淋巴细胞、PBMCs等)和微生物细胞往往很难有效溶解,仅仅添加基于洗涤剂的裂解缓冲液可能并不够。为了提高裂解效果,可以将裂解缓冲液与机械裂解步骤(研磨珠破碎)匹配,或者在裂解液上游加...

羡慕师兄 RNA 提取做得又快又好,原来他在偷偷用这个...

最短10min即可完成RNA提取高得率、高纯度让你的基因研究一路畅通!01.动物组织、细胞是它的强项,细菌总RNA的提取也不在话下!打开网易新闻查看精彩图片打开网易新闻查看精彩图片分别提取15mg大鼠肾脏(高RNA含量)、肺脏(中RNA含量)、10ml菌液样本总RNA,洗脱体积50μL。1%琼...

高通量测序之RNA提取那点事~~

2.氯仿在RNA抽提过程中的作用苯酚对蛋白质的变性作用远大于氯仿,但是酚的比重略比水重,碰到高浓度的盐溶液,离心后酚相会跑到上层,不利于含RNA的水相的回收;但加入氯仿后可以增加比重,使得酚/氯仿始终在下层,方便水相的回收;另外酚与水有很大的互溶性,如果单独用酚抽提,抽提后仍有大量的酚溶解到水相中,其会抑...

用假TRIzol 提 RNA 十几次后,怨种我总结了 5 大识别方法

1987年,PiotrChomczynski和NicolettaSacchi使用了改良的硫氰酸胍-苯酚-氯仿萃取法提取得到样本中的总RNA。在1990年,优化该方法后,推出商业化的TRIzol试剂。TRIzol试剂进行样本匀浆化后,不但可以破坏细胞,溶解细胞组分,同时还可高效的抑制RNA酶的活性,维持RNA的完整性。同时TRIzol试剂允许按顺序...

RNA提取的操作步骤、注意事项和常见问题分析

1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800mlTRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μgRNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可...

冠状病毒是什么?人感染后会怎样?中国疾控中心发文释疑

(3)在每一个特定检测中对原临床标本使用两种不同的方法，或从原标本新提取RNA开始重复PCR检测阳性(www.e993.com)2024年11月18日。PCR检测结果的确认：①使用原始标本重复PCR试验;②在第二个实验室检测同一份标本。2.SARS-CoV特异性抗原N蛋白检测定性检测血清或血浆标本中SARS-CoV核衣壳(N)抗原，用于SARS-CoV感染的早期辅助诊断。3.SARS-CoV...

洁厕灵与84消毒液不能混用,消杀新冠病毒的消毒剂还有这些“雷区”

根据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第九版)》,部分化学消毒剂,例如乙醚、75%乙醇(75%酒精)、含氯消毒剂、过氧乙酸、氯仿等,均可有效灭活病毒。因为冠状病毒是一类具有包膜的RNA病毒,当包膜被消毒剂破坏后,RNA也非常容易被降解,从而使病毒失活。但具体在办公和居家场所如何选择和使用这些消毒剂,又如何在起到消...

拍击式无菌均质器提取DNA的实验操作案例分享

1.生物领域:生物实验室常使用拍击式无菌均质器来破碎细胞壁,提取其中的DNA、RNA以及蛋白质等物质。它也广泛应用于基因组学和蛋白质组学等领域的研究。2.医学领域:医学实验室经常需要处理大量的生物样品,拍击式无菌均质器可快速破碎细胞壁,释放出其中的生物物质,为医学研究和诊断提供帮助。

【前沿科普】染色质可及性:探索功能基因组的窗口

TF,转录因子(transcriptionfactor);PolⅡ,RNA聚合酶Ⅱ叩开与蛋白质结合之门为了研究在不同的细胞生物进程中染色质的结构与其功能之间的关系,就需要对活跃的开放区域进行分析。目前研究染色质可及性的方法主要是将酶切法或物理化学方法与下一代测序技术结合,检测染色质开放或受保护的区域。常用的方法有脱氧核...

治疗预防兼具,卫生事件的“特效药”中和抗体商业化价值有多大?

S蛋白能够识别并结合宿主细胞表面受体,在介导病毒包膜与细胞膜融合方面有关键的作用;M蛋白参与病毒包膜的形成与出芽过程;N蛋白与病毒RNA结合,是一种具有高度免疫原性的蛋白,参与基因组复制和细胞信号通路的调节。由于N蛋白的序列保守性和强大的免疫原性,常被用于开发冠状病毒诊断检测试剂。HE蛋白则是构成包膜的短凸起,...