拍击式无菌均质器提取DNA的实验操作案例分享

4.破碎细胞:将混合液移入拍击式无菌均质器的样品杯中,设置好相应的参数(如拍击次数、拍击间隔等),启动设备进行细胞破碎。5.提取DNA:破碎完成后,将破碎液转移至离心管中,加入适量的酚氯仿-异戊醇进行有机抽提,再加入氯仿-异戊醇进行第二次抽提。6.DNA沉淀:将上清液转移至新的离心管中,加入适量的无水乙醇沉...

磁珠法核酸提取过程中的6种常见误区

所以很多时候,虽然增加裂解液和洗涤液确实能够起到增强裂解和增强洗涤的作用,但磁珠法提取的核心是磁珠吸附核酸的效率,无法保证磁珠碰撞效率是不能保证核酸提取效率的,所以单纯增加试剂使用量改善提取效果并不一定完全有效。对于GNT-B02全血基因组DNA试剂盒而言,一般裂解液使用量不应超过400ul/次,洗涤液使用量不应超过...

植物基因组DNA的提取实验原理和实验步骤

再加入苯酚和氯仿等有机溶剂,能使蛋白质变性,并使抽提液分相,因核酸(DNA、RNA)水溶性很强,经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀,沉淀DNA溶于TE溶液中,即得植物总DNA溶液。三、实验材料水稻幼叶四、主要试剂配方2%CTAB抽提缓冲溶液:CTAB4gNaCl16.364g...

生化实验中常用有毒物质的危害与防护

异戊醇它被吸人、口服或经皮肤吸收有麻醉作用。其蒸气或雾对眼睛、皮肤、粘膜和呼吸道有刺激作用,可引起神经系统功能紊乱,长时间接触有麻醉作用。操作时应戴合适的手套和安全眼镜并始终在化学通风橱里进行。含水酚液它含有苯酚,对皮肤、粘膜有强烈的腐蚀作用,可抑制中枢神经或损害肝、肾功能。吸人高浓度苯酚蒸...

认识食品中的非法添加物

部分违法者主要使用硼砂与硼酸在腐竹、肉丸、凉粉、凉皮、面条、饺子皮等食品中,起到增加食品韧性、脆度、保水性和保存期的作用,起到防腐和改良面粉的作用。3.如何识别添加硼砂的食品?添加了硼砂的面制品和腐竹色泽亮丽,韧度高,久煮不糊。添加了硼砂的肉制品表面有白色的粉末状物质,用手摸有滑腻感。

特邀专家方法 | 植物转录因子与DNA互作研究详细技术方案

Y1H是酵母双杂交的衍生技术,用于分析转录因子与DNA之间的相互作用,以研究真核细胞中的基因表达调控(LiandHerskowitz,1993)(www.e993.com)2024年11月10日。在Y1H分析系统中,将特定顺式作用元件构建到pLacZ2μ酵母表达载体上,将编码转录因子的cDNA构建到pB42AD酵母表达载体上。将上述2种融合表达载体共转化至酵母细胞中,此时转录因子若...

核酸知识系列(四)|DNA|缓冲液|异戊醇|核酸|-健康界

在抽提DNA时,为了混合均匀,必须剧烈振荡容器数次,这时在混合液内易产生气泡,气泡会阻止相互间的充分作用。加入异戊醇能降低分子表面张力,所以能减少抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊酵为24:1之比。也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25:24:1(不必先配制,可在临用前把一份酚加一份24:1的氯仿...