蛋白质浓度测定常用的三种方法
考马斯亮蓝G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰(lmax)的位置,由465nm变为595nm,溶液的颜色也由棕黑色变为蓝色。通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。研究发现,染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合。突出优点(...
动物基因组DNA、总RNA的提取及含量测定
理论基础核酸是遗传信息的携带者,是生命的最基本物质,它和蛋白质是构成生物体的主要成分;按化学组成可以将核酸分成两大类:①含脱氧核糖核酸(DNA),主要存在于细胞核中;②含核糖核酸(RNA),主要存在于细胞质内;在生物体中核酸以结合成核蛋白的形式存在,但核酸理论基础核酸是遗传信息的携带者,是生命的...
生物分析专栏 | 寡核苷酸药物的药代动力学及其生物分析
含硫代磷酸骨架的药物具有较高的血浆蛋白结合率,达90%;N-乙酰半乳糖胺修饰的ASO与未修饰类似,同样具有高达98%的血浆蛋白结合率。尽管经过化学修饰具有良好的代谢稳定性,吗啉代ASO药物的血浆蛋白结合率较低,如Eteplirsen的蛋白结合率低至6.1%??16.5%,但同时,24h内其肾脏排泄清除率可达60%??70%。此外,siRNA的蛋...
Western Blot 蛋白样品的定量方法选择
反应化合物在465-595nm处有最大的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可检测595nm的光吸收值的大小计算蛋白的含量。BCA法优点1.准确:变异系数远小于考马斯亮蓝染色法(bradford法)2.线性范围宽,检测灵敏,检测范围:20-2000μg/ml3.与金属离子、还原剂和螯合剂、去...
植物乳杆菌D1501发酵黄浆水的抑菌活性及其中细菌素的分离与鉴定
3.1蛋白质含量的标准曲线在595nm波长下,吸光度A595nm与蛋白质量浓度的回归方程为y=1.05x+0.0029,相关系数R2=0.9989。式中:y为595nm波长处的吸光度;x为蛋白质质量浓度(mg/mL)。3.2细菌素Nisin效价曲线Nisin标准效价的对数值与抑菌圈直径的回归方程为y=1.7679x+0.463,相关系数R2=0.998...