热点剖析:RNA 修饰-m7G 发生机制及研究方法
WesternBlot的条带黑度反映蛋白的相对量,数值则提供了量化的比较。检查内参蛋白表达稳定性:GAPDH和U6通常用作内参,确保实验中蛋白质加载量的一致性。对比GAPDH和U6的表达稳定性来判断实验的可靠性。例如,Huh7细胞中GAPDH在Par和LR之间表达变化不大,而U6表达在LR中略有下降。PLC/PRF...
干货分享:蛋白质融合表达的标签及切割研究汇总
另一种方法是使用大的肽类或蛋白质作为融合蛋白,它们的使用可以增加目标蛋白的溶解性。缺点是对于一些应用如结晶或抗体产生等,标签必须加以去除。一般来说,对于特定的目标蛋白很难决定最佳的融合系统。这取决于目标蛋白本身(如稳定性,疏水性),表达系统,纯化后蛋白的用途。01融合标签融合标签的作用是用于检测和纯化...
上海交大夏小霞教授/钱志刚研究员AFM综述:人工蜘蛛丝材料的创制
分子设计后,选择合适的表达策略可以保证人工蛋白质的生产水平及质量,常见手段包括宿主选择、翻译后蛋白质聚合、细胞和代谢工程等。蜘蛛丝蛋白的超长且高度重复的序列造成的遗传不稳定、对某些转运RNA(tRNA)的高需求、转录或翻译的过早终止以及大蛋白产物的潜在降解等问题,导致高效生产难题。夏小霞-钱志刚联合研究团队使用代...
Nature评选今年值得关注的七大科技:蛋白质设计、脑机接口、细胞...
ONE基于膨胀显微成像技术,将样品中的蛋白质与水凝胶基质进行化学耦合,再将蛋白质酶解,随后让水凝胶的体积膨胀到1000倍。蛋白碎片因此在各个方向上被均匀拉伸,既保留了蛋白质结构,又让使用者能够使用常见共聚焦显微镜,分辨出原本仅仅相隔几纳米的特征。在谈到蛋白质的特征形状时,里佐利说:“我们提取抗体,将它们放入凝胶...
科学家从头设计酸碱响应性自组装螺旋蛋白质纤维,在高分辨率结构...
沈浩解释说道:“这样能够让合成的基因在细菌内表达蛋白,通过生物化学的方式纯化蛋白质,进行电子显微镜的结构表征。然后,找出能够形成微米尺度纤维的设计,通过冷冻电子显微镜来解析纤维结构。”另一方面,该课题组采取了多种方式,对所设计的纤维进行酸碱响应性表征。具体来说,基于电子显微镜,能看到不同酸碱度下纤维平衡态...
胶原蛋白纯化工艺开发及优化
天然胶原蛋白主要来源于动物结缔组织,如皮肤、骨骼、肌腱等,也可以从水生生物如鱼鳞、鱼皮和鱼骨中提取,其常见提取方法包括热水浸提法、酸碱水解法、酶解法等(www.e993.com)2024年9月7日。而利用DNA重组技术制备的,包含人胶原蛋白特定功能域的蛋白质称为重组胶原蛋白,它通常由选定的宿主细胞(如大肠杆菌、酵母、转基因动植物等)表达系统产生,具有...
纯化大师班FAQ合集(内含讲座回放)
·去除疏水蛋白或蛋白沉淀、脂蛋白:使用1CV1MNaOH,接着马上用4CV的去离子水平衡。·去除脂类、极疏水蛋白:使用0.5CV30%异丙醇,或者70%乙醇,马上使用2CV去离子水平衡柱子。Q7:AC/IEX/HIC/MM层析柱的清洗方法是什么?A7:·根据填料所能耐受的pH,选择合适浓度的NaOH进行清洗(尤其是抗体亲和);·...
什么是Hoodream??脾蛋白肽(SPP)?
脾蛋白肽(SPP)系从健康动物脾脏,经生物催化提取、定向纯化、超低温冷冻干燥等工艺技术制得的具有免疫调节作用的肽类物质,主要成分为小分子多肽、天然游离氨基酸、核糖核酸及Zn、Ca等微量元素,是一种天然安全的免疫调节剂[2],具有双向调节细胞免疫力,抗炎,促进消化吸收,调理脾胃等作用。
腺病毒的下游纯化方案
腺病毒的下游纯化方案转自:楚天人TRUKINGMICRO-SPHERE细胞与基因治疗(CellandGeneTherapy,CGT)是一种通过基因表达、沉默或体外改造手段,在蛋白质水平进行调控的疗法。基因载体的体内递送目前常见的基因载体分为非病毒载体和病毒载体。非病毒载体包括质粒或裸露DNA(非病毒)、LNP递送系统等,但体内转染效果差、...
陈玲玲:RNA有自己的特点,别把它当蛋白质来“玩” | 走近科学
LncRNA和circRNA的研究方法已经成熟了吗?人们一直在不断拓展RNA的研究方法。目前,蛋白质研究中可以做的免疫沉淀、生物成像、结构解析等手段,在RNA中也可以做,但是相对来讲,还不如蛋白质研究那么便捷,并且精度也尚不能达到蛋白质研究的程度。此外,研究环形RNA还会更难一点,因为研究者需要在细胞中把环形RNA和与它序列...