提起做 qPCR 的这些体验,科研人嘴角就压不住了(有奖答题)

02曲线漂亮,结果准确-今天的实验进程都很顺利,细节都把握得刚刚好,扩增曲线与熔解曲线一样清爽漂亮,这表明qPCR结果高效、特异,又得到了可靠的结果呢!03效率加倍,高分有望-原计划两周做好的实验,三天就完成了。一些高难度低丰度的样品也成功检出,达到了预期的实验目的,按照这个进度,高分还不是轻松拿下。这...

你做的核酸检测是如何完成的?探访北京友谊医院核酸检测实验室

检验人员进行核酸加样,准备扩增。提取完成的核酸被密封到反应孔中,再由传递窗口送到扩增区。近20台设备工作时发出嗡嗡声,持续散发着热量。它们将微量的新冠病毒片段成千上万倍地放大。结果出来后,吕治盯着电脑屏幕,和同事一起分析扩增曲线,判读检测结果。试剂及实验材料以及核酸样本都是通过机械连锁传递窗出入制备...

真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI

3.外泌体做qPCR检测应该选什么参照?外泌体没有通用的内参选择,可以使用外参(cel-miR-39)作为参照。4.外泌体多样本进行qPCR检测时,扩增曲线和溶解曲线有差异,是否正常?一般来说属于正常现象,由于外泌体不像细胞或者组织来源稳定,不同外泌体样本及处理的差异,可能导致外泌体里核酸含量及片段大小不同...

抗疫一线:他在武汉做检验

目前他的工作其实没原来紧张了,更多实验操作的事情交给了更年轻的同事,他会做一些指导工作。他们需要分辨疑似患者。其实试剂盒都有判断说明书,如果PCR扩增曲线不规则,只出来1个扩增点,即1个靶标,那么就都要发疑似报告。疑似病例他们会建议重新采样检测。如果出现两个峰,PCR扩增曲线很典型,那么就是阳性。

屡做屡败?手把手教你 qPCR、测序、蛋白表达!

工作做的是不少,拿到的有效数据却少得可怜,其中有三类实验,最常出现问题,那就是:师妹师姐,蛋白表达不出来要怎么解决呢?师姐,纯化过程中,蛋白出现了浑浊,怎么办呀?师弟师姐,NGS测序报告怎么解读,这么多数据哪个有用啊?师弟师姐,qPCR扩增曲线无法达到平台期是怎么回事啊?

PCR实验室核酸检测的常见问题及异常结果分析

1、首先我们看一下PCR正常扩增曲线,是比较平滑的S型曲线,见下图:2、常见异常结果分析2.1案例12.1.1现象:常见单基因翘尾且出现较大的Ct值和单基因翘尾无Ct值现象,见下图:2.1.2常见原因:阴性质控曲线翘尾,存在阳性质控或阳性标本污染;样本曲线翘尾,表示目的基因浓度低或者存在非特异性扩增或者存在污染(www.e993.com)2024年11月4日。

一例艾滋病合并TB并NTM病的诊疗过程

图1GeneXpertMTB/RIF扩增曲线图图2瘰疬分枝杆菌DNA微阵列芯片法荧光图示抗结核已经治疗两个月,调整抗结核和瘰疬分枝杆菌治疗方案:利福布汀(0.3g/d)+异烟肼(0.3g/d)+乙胺丁醇((0.75g/d)+阿奇霉素(0.5g/d)+氯法齐明(200mg/d),2月后氯法齐明改为100mg/d。

走近核酸检测员:一群“离病毒最近的人”

新冠病毒核酸检测剩余的工作都在扩增分析区进行,主要是通过特定的PCR仪器进行基因扩增,核酸检测员在实时荧光定量扩增仪上进行设置参数和编号后,即可上机启动扩增反应。反应结束,仪器会自动保存结果,操作人员对检测靶标以及内标的扩增曲线分别进行分析,并查看质控是否合格。“在内标正常的情况下,对于阴性结果,我们会直接报告...

揪出新冠病毒的人

工作在负压P2实验室进行,一共分三个区域——试剂准备区,有一个超净台,保证配完的试剂不被外界污染;样品准备区,也是主要污染区,微生物实验室技术人员在这个区域的生物安全柜里操作样本,并提取核酸,该区域还有高压锅,所有污染性材料经过高压消毒才能带出;扩增区里有5台PCR仪,在仪器上可以看到扩增曲线,最后得到阴性...

那么问题来了,qPCR又是什么?

图注:从扩增曲线获得标准曲线(来自网络)如上图可得,如果起始模板量浓度高,则可在较早的循环中观察到扩增,CT值小;如果起始模板量浓度少,则会在稍后的循环中观察到扩增,CT值大。对于标准品如何选择或者制备,标准曲线的绘制,请在其它学习平台搜索了解,这里小编就不一一写出来啦!