PCR、qPCR、dPCR、RT – PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR;傻傻分不清?
实时荧光定量PCR,也叫Real-TimePCR,即二代PCR,是指在PCR扩增反应体系中加入荧光染料或者荧光基团,在整个PCR过程中通过收集荧光信号实时监测每一个循环中扩增产物量的变化,最后通过标准曲线和CT值对待测样品进行定量分析。qPCR常用的有两种方法:SYBRGreen法和TaqMan探针法。①荧光染料法(SYBRGreen):SYBRGreenⅠ...
YY/T 1918-2023《数字聚合酶链反应分析系统》于2024年9月15日实施
数字PCR技术是在荧光定量PCR技术的基础上将PCR反应液进行有限稀释,将核酸样本分散到成千上万个等体积反应单元中,然后进行PCR扩增和检测,可以不依赖标准曲线直接进行绝对定量,其检测灵敏度、精密度和抗抑制能力等均较荧光定量PCR技术有了非常大的提高,在感染性疾病早期检测、癌症的液体活检、无创产前检查等领域展现出良好...
一文揽尽:荧光定量PCR扩增曲线哪个阶段最重要
qPCR扩增曲线一般分成四个阶段:基线期、指数期、线性期和平台期。那么每个阶段PCR产物量的变化都有什么区别呢?哪个阶段最重要呢?小编这就一一道来。基线期PCR起始时,刚开始前几个循环的荧光信号还没有发生变化,接近一条直线,将其称之为基线,一般是3-15个循环。在基线期内,扩增的荧光信号被背景荧光信号所掩盖,...
收藏!PCR异常扩增曲线分析攻略
如果0.1ml加热模块用成0.2ml耗材,则会造成耗材压扁,甚至造成机器故障;如果0.2ml加热模块用成0.1ml耗材,则会造成反应管的外壁和荧光定量PCR仪器的温控模块没有充分接触,从而出现热传导不充分,进而影响酶的活性,会引起重复性不好(图四),或者溶解曲线多峰(非特异扩增),甚至是假阴性结果;图四:耗材规格跟加热模块不...
实时荧光定量PCR仪使用方法
在实时PCR仪中,设置PCR参数,包括反应温度、循环程序、扩增效率、目标长度等。此外,还需要设置测量周期、检测通道等。5.进行PCR扩增启动实时PCR仪,进行扩增过程,从而监测PCR反应的进展和结果。实时PCR仪会在反应期间进行荧光检测和数据收集。6.数据分析...
大规模新冠核酸筛查中出现的异常扩增曲线分析
在新冠核酸扩增结果判读过程中,我们会遇见各式各样的异常曲线(www.e993.com)2024年10月23日。本文就2022年3-4月吉林长春体育中心气膜实验室所遇见的异常曲线,做一个经验分享与探讨。01前言随着国内新冠肺炎疫情防控措施的加大,常态化核酸检测筛查力度和检测范围的持续加强,现已建立了大量专业的PCR实验室、储备了大量专业的核酸检测人员用于新冠疫...
高达72靶标!中国团队实现高阶多重荧光PCR技术突破!
导读:在2022年2月24日在线发表于《美国国家科学院院刊》(PNAS)的一项研究中,厦门大学生命科学学院李庆阁团队报道了一种称为“MeltArray”的荧光PCR新技术。实时荧光PCR(rtPCR)是目前应用最广的核酸检测技术,检测模式采用闭管检测,相对于开管检测而言,rtPCR极大降低了扩增产物的污染机会,节省了时间和人力,便于实...
实时荧光PCR检测沙门氏菌(salmonella.spp)
使用博日Line-Gene荧光PCR检测仪时,在运行扩增程序前,先把增益值调至30左右。运行结束后点击数据分析进入结果分析界面,选择样点拟合法进行结果分析:零点调整取1-10或1-15个循环的荧光信号;在噪声容限界面下调整基线位置,其设定原则以阈值线刚好超过正常阴性对照扩增曲线(无规则的噪音线)的最高点为准,选择定量分析...
202个创新医疗器械盘点
该产品用于从人外周血提取的基因组DNA中定性检测亚甲基四氢叶酸还原酶C677T的基因型,为高同型半胱氨酸水平或叶酸代谢异常患者提供更多辅助诊断手段。5.Septin9基因甲基化检测试剂盒(PCR荧光探针法)注册人:博尔诚(北京)科技有限公司该产品用于体外定性检测人外周血血浆中Septin9基因甲基化,可提供一种非创伤性结...
202个创新医疗器械盘点_手机新浪网
该产品用于从人外周血提取的基因组DNA中定性检测亚甲基四氢叶酸还原酶C677T的基因型,为高同型半胱氨酸水平或叶酸代谢异常患者提供更多辅助诊断手段。5.Septin9基因甲基化检测试剂盒(PCR荧光探针法)注册人:博尔诚(北京)科技有限公司该产品用于体外定性检测人外周血血浆中Septin9基因甲基化,可提供一种非创伤性结...