拍击式无菌均质器提取DNA的实验操作案例分享
4.破碎细胞:将混合液移入拍击式无菌均质器的样品杯中,设置好相应的参数(如拍击次数、拍击间隔等),启动设备进行细胞破碎。5.提取DNA:破碎完成后,将破碎液转移至离心管中,加入适量的酚氯仿-异戊醇进行有机抽提,再加入氯仿-异戊醇进行第二次抽提。6.DNA沉淀:将上清液转移至新的离心管中,加入适量的无水乙醇沉...
植物基因组DNA的提取实验原理和实验步骤
再加入苯酚和氯仿等有机溶剂,能使蛋白质变性,并使抽提液分相,因核酸(DNA、RNA)水溶性很强,经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀,沉淀DNA溶于TE溶液中,即得植物总DNA溶液。三、实验材料水稻幼叶四、主要试剂配方2%CTAB抽提缓冲溶液:CTAB4gNaCl16.364g...
核酸提取、纯化与常见问题解答
但简单地增加样本取样量,有时会引入过多的杂质,超出裂解液裂解能力,也会使提取效率降低,所以并不推荐通过简单的增加样本取样量的方式来达到增加提取量的目的。如果确实是由于样本量不足而引起的提取量过低,建议在前处理先经过富集或者浓缩步骤再开始提取。或者增加裂解的完全性,使更多的核酸暴露出来也是一种解决方法。
鸭绒及鹅绒制品实时荧光PCR鉴定方法研究
2.2.1DNA提取挑取带毛囊的羽绒,剪取毛囊部位约0.03g样品,加入3mL2%SDS溶液[2%SDS,50mmol/LTris·Cl(pH值8.0),20mmol/LEDTA(pH值8.0)],65℃水浴1.5h,不时振荡;12000r/min离心5min,取上清;加入3mL羊毛提取液[4mol/L异硫氰酸胍,0.3mol/L氯化钠,4%PVPK-40,50mmol/LTris·Cl(pH值8.0),20...
生化实验中常用有毒物质的危害与防护
异戊醇它被吸人、口服或经皮肤吸收有麻醉作用。其蒸气或雾对眼睛、皮肤、粘膜和呼吸道有刺激作用,可引起神经系统功能紊乱,长时间接触有麻醉作用。操作时应戴合适的手套和安全眼镜并始终在化学通风橱里进行。含水酚液它含有苯酚,对皮肤、粘膜有强烈的腐蚀作用,可抑制中枢神经或损害肝、肾功能。吸人高浓度苯酚蒸...