滚轴混合仪在基因克隆表达实验中如何使用
准备实验材料:包括PCR反应体系所需的各种试剂(如模板DNA、引物、dNTPs、缓冲液、酶等)、连接反应所需的载体和目的基因片段、以及滚轴混合仪等实验设备。二、PCR反应配制PCR反应体系:按照实验要求,将模板DNA、引物、dNTPs、缓冲液和酶等试剂加入到PCR管中,混合均匀。设置PCR程序:根据实验需求,设置PCR仪的扩增程序,...
中科院动物所金坚石组综述16S rRNA基因扩增子测序技术的前世今生
以下是大多数已发明的16SrRNA基因扩增子测序方法的标准流程:通过一对靶向16SrRNA基因保守区域的通用引物扩增菌群中细菌的16SrRNA基因,并利用高通量测序平台测序获得所有扩增的16SrRNA基因的序列。高通量的16SrRNA基因扩增子测序方法有以下优点:该方法基于16SrRNA基因的扩增,因此可以适用于未培养的细菌或低生物...
探讨如何选择适合的热启动Taq酶
传统PCR中,反应体系的各组分(Taq酶、dNTP、引物等)会一并加入并进入循环,在反应温度由室温升高至94~95℃过程中,引物在低温下就会结合到非特异性序列上,导致DNA模板被非特异性扩增。热启动PCR技术的出现很好的解决了这个问题。将Taq酶的加入时间推迟到第一个循环的退火步骤。因为只有在90℃以上的初始变性步骤之后...
上新| 预混久稳,扩增快准——qPCR“一管式”原料解决方案重磅上线
临床检测中经常在一次反应中检测多个靶标,多重体系中引物、探针之间的互搭现象较为常见,预混过程中“引物互搭+酶活泄露”会促使互搭延伸导致原料的消耗,引起预混稳定性下降,靶标扩增性能变差。由此可以看出,“封闭率较高的试剂”和“特异性更优的引探”这2个关键因素缺一不可!为了降低多重体系中易形成引物二...
国家食品安全风险评估中心关于完善“三新食品”安全性评价资料...
应详细描述生产过程中去除外源基因的处理工艺步骤和参数,并提供产品中无外源引入基因残留的检测报告。采用聚合酶链式反应(PCR)方法对生产菌株的特定脱氧核糖核酸(DNA)片段(包括目的基因、报告基因、标记基因等)进行检测。PCR方法涉及的样品采集、DNA提取、PCR扩增和质量控制要求见附件1。
四川中医药科学院: 基于高通量测序中江丹参“发汗”过程中优势微...
细菌主要针对16SrDNA的V1~V9区进行扩增,引物为16S-F(5’-GCTCGTGTCGTGAGATGTT-3’)和16S-R(5’-TGTAGCCCAGGTCATAAGG-3’),其他条件与真菌一致(www.e993.com)2024年10月23日。所有样品的PCR产物用2%琼脂糖凝胶电泳检测,参照电泳初步定量结果,对目的条带使用索莱宝公司提供的凝胶回收试剂盒回收产物,PCR...
诺唯赞2023年年度董事会经营评述
伴随高通量测序市场快速增长与应用领域扩大,公司基于科研试剂开发过程中积累的蛋白质定向改造与进化技术,开发了适用于高通量测序的基因测序系列生物试剂包括DNA建库、RNA建库、磁珠、定量、单细胞扩增、表观遗传学等系列,主要面向我国基因测序服务企业,相关应用场景涵盖科研服务、医学研究、肿瘤诊断、生殖生育、伴随诊断、病...
明德生物2023年年度董事会经营评述
PCR技术是目前分子诊断主流技术平台,主要优势在于高灵敏度、易于推广,主要局限在于检测位点单一且已知;数字PCR(dPCR)通过将样品分配到大量独立微单元进行反应扩增,并利用试剂或探针检测靶标序列进行分布统计,实现靶标分子绝对计数,从而实现定量检测;多重PCR通过在单次PCR反应中添加多种特异性引物进行扩增从而得到多个目标...
基因检测在疾病确诊、家系遗传模式分析与再生育计划中的重要作用
DNA分解成单链以引物为模板,通过DNA聚合酶合成新的互补核苷酸,形成互补链该链继续延伸,直到双脱氧核苷酸(链终止核苷酸)添加到链上,形成片段双脱氧核苷酸根据其携带的核苷酸(腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和胸腺嘧啶)用不同颜色的染料标记这个过程重复多次,产生不同长度的片段用毛细管凝胶电泳分析所得片段;最短的片段...
诺唯赞2023年年度董事会经营评述
伴随高通量测序市场快速增长与应用领域扩大,公司基于科研试剂开发过程中积累的蛋白质定向改造与进化技术,开发了适用于高通量测序的基因测序系列生物试剂包括DNA建库、RNA建库、磁珠、定量、单细胞扩增、表观遗传学等系列,主要面向我国基因测序服务企业,相关应用场景涵盖科研服务、医学研究、肿瘤诊断、生殖生育、伴随诊断、病...