师弟一举赢得 qPCR 「最美」曲线,暗藏哪些小心机?
完整的qPCR实验设计应包括实验组(处理样本)、阳性对照组(野生型或参考样本)、阴性对照组、空白对照组。其中,空白对照,即未添加模板的qPCR体系,用来验证qPCR体系是否受到污染。阴性对照,即添加阴性模板的qPCR体系,用于排除实验操作导致的假阴性。三.数据处理(相对定量法)1.目的基因Ct值的归一化:...
农业农村部公告第731号 | 2个疫苗产品通过应急评价;非洲猪瘟病毒...
2.2.1阴性对照:Ct值>38或无Ct值,且无典型扩增曲线。2.2.2阳性对照:Ct值≤30,且呈典型扩增曲线。2.3结果判定2.3.1样本检测结果Ct值≤35,呈典型扩增曲线,判定为阳性,表明样本中有非洲猪瘟病毒核酸。2.3.2样本检测结果35<Ct≤38范围,且呈典型扩增曲线,判定为可疑。此时应对样本进行...
指南共识丨纳米孔测序在病原微生物检测中的应用专家共识
不同应用方向的测序技术,其建库方式不同,例如,tNGS要保证病原微生物的特异性扩增或捕获效率;mNGS更注重无偏倚扩增;WGS则可在不打断核酸的情况下测序,纯菌液样本只需1μg即可直接进行WGS,而低起始量的样本可在扩增后进行,例如COVID-19在循环数阈值(Ct值)仅为35时也可在扩增后进行WGS。是否进行PCR扩增和片段化...
《食品科学》:河北医科大学王建昌正高级兽医师等:基于行业标准中...
李亚楠等在SN/T3730.4—2013标准中检出限合理性的探讨中,指出以非混合肉样品的基因组DNA为模板,马成分real-timePCR方法检测Ct值为17.00~20.00的同时,驴成分real-timePCR方法检测Ct值在25.00~35.00范围内,原因可能是对非混合肉样品中马成分的非特异性扩增。与其结论相比,本研究中使用SN/T3730.4驴成分检测Ct...
无创多靶点粪便DNA甲基化用于胃肠肿瘤早检
根据研究方案的指导原则,阳性结果定义为三个基因中的任何一个的ΔCt值[ΔCt=Ct(靶基因)-Ct(GAPDH)]<10。构建单个胃肠道肿瘤的多重logistic回归模型,包括每个基因的?Ct值,以校正胃肠道肿瘤的起源组织。总体而言,124例患者中有98例(79%)癌症检测呈阳性,92名健康对照者中有88名(96%)检测呈阴性。按癌型分,结...
国家疾控局印发猴痘防控方案:密接者需进行21天健康监测
①Real-timePCR反应系统的质量控制:反应结果应同时符合以下2个条件,否则试验结果无效,应重新开展检测(www.e993.com)2024年9月29日。阴性对照无扩增,为阴性。阳性对照未出现阴性结果。②结果判定:A.阴性:双孔Ct值>37,或无Ct值;B.灰区:一孔Ct值>37;C.阳性:双孔Ct值<37。
国家疾控局、国家卫生健康委制定并印发《猴痘防控方案》
①Real-timePCR反应系统的质量控制:反应结果应同时符合以下2个条件,否则试验结果无效,应重新开展检测。阴性对照无扩增,为阴性。阳性对照未出现阴性结果。②结果判定:A.阴性:双孔Ct值>37,或无Ct值;B.灰区:一孔Ct值>37;C.阳性:双孔Ct值<37。
四川昨日新增省内感染者319例;成都新增本土病例小区公布→
对此,王丽萍表示,试点评估发现,入境人员入境后首次核酸检出阳性,CT值≥35的人群大部分是既往感染。随着新的奥密克戎变异株潜伏期进一步缩短,入境人员的管控周期调整为“5天集中隔离+3天居家隔离”。原标题:《四川昨日新增省内感染者319例;成都新增本土病例小区公布→》...
荧光定量 PCR 要点,你掌握了吗?
对于扩增阳性对照来说通常10000拷贝/微升(CT值约25)是比较理想的,但是有一些试剂盒厂家的扩增阳性对照设置在CT值20以下,比大部分阳性样本都强。这么高浓度的对照给实验室带来了巨大的污染风险,原因可能仅仅是因为试剂厂家担心其阳性对照不稳定,长时间存放阳性对照降解。另一种污染来自于扩增产物的处理...
忻州原平市发现1例新冠病毒阳性感染者(附行程轨迹)
第二次核酸结果:伯杰试剂检测刘某宁等单采10人新型冠状病毒核酸样本,其中刘某宁结果为ORF1ab靶标为阳性,Ct值为24.68,N靶标阳性,Ct值为25.09。复测刘某宁单采新型冠状病毒核酸样本伯杰试剂检测结果为ORF1ab靶标为阳性,Ct值分别为26.09、26.28,N靶标阳性,Ct值分别为26.85、27.09。同时用两种试剂进行检测,圣湘试...