猫麻疹病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立
以10倍倍比稀释的重组质粒标准品作为模板进行荧光定量RT-PCR反应,将得到的Ct值作为纵坐标,模板起始拷贝数的对数为横坐标绘制标准曲线(图1A),获得的标准曲线方程为y=-3.1299x+31.947,相关系数R2=0.9949,扩增效率E=108.6%。溶解曲线温度为80.45℃,且为单一峰(图1B)。表明无非特异性扩增和引物二聚...
过年亲手放过的烟花,在师妹的 qPCR 扩增曲线上复现了
正常的qPCR扩增曲线应为S型,理想的CT值范围在20~30。若出现CT值偏大、无平台期或平台期下降等异常情况,可尝试以下调整:●若CT值偏大,可能是模板量不足或基因表达丰度低,建议增加模板量并观察CT值是否按预期倍数减少。●考虑qPCR反应条件或引物设计可能不合适,导致扩增效率降低。此时,...
2024 ELCC丨李娟教授:组织NGS与FISH检测一致性佳,共筑MET扩增晚期...
优化的组织NGS对于MET扩增尤其是局部扩增展现出良好的性能;血液NGS检测的灵敏度也得到提升,但仍有待优化,从而最大限度地筛选出可从双靶联合治疗中获益的潜在患者,研究中首次提出了“灰色区域”的概念,这或对临床医生进行决策时具有一定指导意义。专家点评MET基因位于人类第7号染色体长臂,其所编码的MET蛋白属于酪氨酸...
国产PCR核酸扩增仪10月热度榜(下),采购必备
04简洁的无限多板合并分析、自动识别理想参考基因等多种实用功能。05通过不同图表进行数据分析和可视化展示,可获得更多有意义的数据信息。06提供中文和安全版本。四、灵活多样的连接方式CFXOpus96系统具有全新、易于使用的交互界面和连接选项,旨在无缝、灵活地集成到您的工作流程中。接入以太网或WiFi后...
利用基于四面体纳米结构的NgAgo长期监测超种族核酸
这种实时监测大分子生物标志物的技术对于改善健康管理和提高生活质量具有重要意义。本研究提出了一种TDN-Ng可穿戴设备,能够实现对纵向核酸的实时监测,并在ICU脓毒症患者中展现了潜在的应用前景。通过结合TDN支架和NgAgo蛋白,这种设备具有高灵敏度和稳定性,为未来生物传感器的发展和应用提供了新的思路。通过实时监测...
师弟一举赢得 qPCR 「最美」曲线,暗藏哪些小心机?
1.熔解曲线出现杂峰:1)杂峰在主峰之前,说明存在引物二聚体,建议需要重新设计引物(www.e993.com)2024年10月23日。2)杂峰在主峰之后,大多由非特异性扩增引起,建议调整稀释倍数、减少引物。2.扩增曲线抖动,不光滑或没有平台期可能因为仪器不准或模板不纯。建议进行仪器校准;增大模板稀释倍数。
揭开“内标”未出之谜
本次实验之所以会认为内标基因未出,和我们分子室日常工作习惯也很有关系,一般情况下我们观察的曲线为仪器数据优化处理后的扩增曲线,而非原始荧光曲线。优化处理后的扩增曲线为PCR扩增仪对实时监测到荧光信号进行平滑处理、去除噪声和异常值等操作,通过对这些数据优化处理,可以使得扩增曲线更加平滑、清晰,更容易进行分析和...
2021分子诊断行业深度报告!|基因|诊断|检测|技术|肿瘤|-健康界
和qPCR相比,dPCR优势包括:灵敏度高(可以达到单个核酸分子)、无需标准曲线或参照基因进行对比来测量核酸量、适合环境复杂样品的检测、能够有效区分浓度差异微小的样品。dPCR在国内尚处于起步阶段,目前仅有南京科维思生物的HER2基因扩增检测试剂盒(数字PCR法)获批,在肿瘤伴随诊断、肿瘤早筛、传染病检测、NIPT...
2023十大自主创新医疗器械产品
这款仪器平台完美结合了微流控与恒温扩增技术,能够对核酸分子进行快速、高通量并行处理,大大简化实验流程、提高实验速度,可广泛应用于生命科学与医学前沿科研、食品安全、临床医疗、卫生防疫等领域,为个性化低成本精准医疗检测应用奠定了技术基础。该产品主要由仪器主机、电源线、数据线组成,其中仪器主机主要包含前面板...
国家疾控局、国家卫生健康委制定并印发《猴痘防控方案》
③扩增条件设定:④仪器检测通道选择:使用荧光定量PCR检测仪,选择Fam荧光信号检测通道,收集设在60℃。具体设置方法参照各仪器使用说明书。⑤结果分析阈值设定:使用荧光定量PCR检测仪进行结果分析时,基线取3-10或6-15个循环的荧光信号,阈值设定原则为阈值线刚好超过正常阴性对照扩增曲线最高点,也可根据仪器噪音情况调整...