如何有效克隆数据与信息的完整指南

基因克隆是指将特定基因从一个生物体中提取并复制到另一个生物体中。这种方法通常用于研究特定基因的功能或生产重组蛋白质。基本步骤包括:提取DNA:从供体生物体中提取基因组DNA。切割与连接:使用限制酶切割DNA,并将目标基因连接到载体DNA中。转化:将重组DNA导入宿主细胞(如细菌)中。筛选与扩增:筛选出成功转化的...

疫苗前沿 | 病毒载体与病毒样颗粒:预防感染性疾病疫苗研发的新动向

近几十年来,新的有希望的疫苗平台已经出现,这些平台得到了遗传工程、分子和细胞免疫学、结构生物学、生物信息学、计算生物学、纳米技术、合成生物学等领域进展的支持,如重组病毒载体、病毒样颗粒(VLPs)、mRNA、合成DNA和细菌载体疫苗。此外,疫苗设计新技术是疫苗学中的重要工具,用于克服传统技术的限制,并促进对新威胁(...

Cell Stem Cell:蔡宇伽/王三斌团队报道亚洲首个慢病毒载体成功...

整合位点tag-PCR分析表明,慢病毒载体主要整合至内含子区域,且未形成异常的克隆扩增。除了常规指标的跟踪检测外,研究团队首次建立了地贫基因治疗单细胞DNA测序分析的方法,并通过联合单细胞转录组测序,对患者外周血和骨髓样本进行深入分析。研究表明患者在接受治疗后,外周血细胞中基因修饰的细胞比例不断升高,导入的βA-T8...

《食品科学》:韶关学院柯野副教授等:棘孢木霉天冬氨酸蛋白酶基因...

PCR产物经纯化后连接至pEASY-Blunt载体上,转化至大肠杆菌DH5α菌株中,挑取阳性克隆子进行测序。测序结果表明,克隆的asp基因具有完整的开放阅读框,长度为1359bp,编码453个氨基酸。其DNA序列与数据库公布的序列存在27个碱基突变,相似性为98.01%;推测编码的氨基酸序列存在3个氨基酸残基突变,分别为D251G、S289A和N397D。

Nature Methods | 突破蛋白质功能研究瓶颈:ORFtag高效标记与筛查...

ORFtag使用含有启动子、选择基因、功能标签和剪接供体序列的逆转录病毒载体。通过大规模转染培养的细胞,ORFtag盒随机整合到基因组中,并通过将功能标签与整合位点下游的剪接受体位点剪接,驱动邻近内源基因座的转录,形成近N端融合蛋白。具体来说,ORFtag是基于逆转录病毒载体,这些载体包含一个启动子、一个选择基因和一...

小优读文献∣多重碱基编辑在人类基因组中将TAG转化为TAA密码子

基因组编码是通过基因工程来理解和增强生物体基因组功能的有力工具(www.e993.com)2024年11月6日。全基因组编码已被证明可以调节细菌中的非标准氨基酸、生物防护和病毒耐药性。在原核生物中,通过用TAA取代TAG终止密码子和删除RF1因子,首次建立了基因编码。通过用同义密码子替换两个同义密码子,删除相应的转移RNA(tRNA)进行编码在大肠杆菌中实现了全...

国自然撰写:经典分子机制研究(一)|位点|质粒|扩增|dna|rna|聚合酶...

2.4转录因子A参与基因B转录调控为了进一步说明转录因子A在基因B转录调控中的生物学作用,我们运用RNAi技术在基因B高表达的cell-1细胞中下调转录因子A的表达,然后观察基因B的变化;反之在基因B低表达的cell-2细胞中通过瞬时转染转录因子A真核表达载体过表达转录因子A,然后观察基因...

科创前沿 | 基因工程更加精准编辑生物体

“基因工程应用基因编辑、遗传工程、重组DNA技术、分子克隆及基因克隆等,被认为是生物技术中发展速度最快、创新成果最多、应用前景最广的核心技术。”美国国家科学院院士、南方科技大学前沿生物技术研究院院长朱健康说。随着对基因工程研究不断深入,人们不仅想了解基因,还渴望改变它们,从而提高农作物的产量、改善生物体的...

基因递送外包企业云舟生物冲刺科创板 市场上强敌环伺 公司科创...

云舟生物回复称，BAC和YAC载体是容纳非常大的基因序列的克隆载体，因此，无法通过常规分子克隆手段对BAC、YAC载体上的序列进行修改，需要具备较高水平的DNA拼接技术、鉴定及测序技术，并且还需具备使用特殊克隆修饰工具的技术实力。总而言之，进入该领域的门槛较高。正是因为门槛较高，目前行业内具备BAC修饰、YAC修饰能力...

和元生物2023年年度董事会经营评述

和元生物深耕聚焦细胞与基因治疗技术服务领域,专注为细胞与基因治疗的基础研究提供基因治疗载体研制、基因功能研究等CRO服务,以及为细胞与基因药物的研发提供IND-CMC药学研究、临床样品GMP生产等CDMO服务。基于公司自主搭建的分子生物学平台、实验级病毒载体包装平台、细胞功能研究平台、SPF级动物实验平台、临床级基因治疗载...