...集美大学刘光明教授等:拟穴青蟹精氨酸激酶的重组表达及致敏性...

将产物回收,构建分段克隆载体,转入Top10克隆宿主大量扩增后,回收质粒,将目的条带与pET-28a载体双酶切后连接,构建分段表达载体,转化BL21表达宿主。选取菌落PCR阳性克隆子进行测序。1.2重组蛋白的诱导表达及nAK、rAK、分段表达产物的纯化将测序结果正确的宿主表达菌在37℃下诱导表达后,提取超声处理的上清液和沉淀,...

...农业大学韩成贵/王颖团队建立应用于菊科作物的高效病毒载体系统

该研究在构建的ZiMMV侵染性克隆基础上,在病毒NIb和CP蛋白的切割位点处引入外源表达基因以及蛋白酶切割位点,构建了一系列病毒表达载体。首先利用ZiMMV载体携带eGFP基因(图1A),绿色荧光观察和分子检测显示重组载体至少连续45天稳定地系统侵染百日菊植株,尤其ZiMMV-eGFP能侵染花器官,花瓣组织呈现明显的荧光效果,同时,重组...

...植保学院韩成贵/王颖团队建立了应用于菊科作物的高效病毒载体...

在构建了ZiMMV侵染性克隆的基础上,在病毒NIb和CP蛋白的切割位点处引入外源表达基因以及蛋白酶切割位点,构建了一系列病毒表达载体。利用ZiMMV载体携带eGFP基因(图1A),绿色荧光观察和分子检测显示重组载体至少连续45天稳定地系统侵染百日菊植株,尤其ZiMMV-eGFP能侵染花器官,花瓣组织呈现明显的荧光效果,同时,重组病毒连续3...

67名受试者7人致癌!曾经最贵的药物曝出高风险

腺病毒载体也被广泛用于基因疫苗研发，在包括新冠病毒等多种病毒感染的预防中得到了应用。例如，阿斯利康的Vaxzevria疫苗（AZD1222）、强生的Janssen疫苗（Ad26.COV2.S）以及中国康希诺生物的重组新型冠状病毒疫苗（5型腺病毒载体）克威莎。另一大类载体是非病毒载体，由于不与细胞的基因组整合，因此具有较高的安全性...

疫苗前沿 | mRNA 癌症疫苗的最新进展

摘要:信使RNA(mRNA)癌症疫苗的研发已经通过应用个性化的癌症抗原、mRNA的结构优化,以及开发替代的RNA基表达载体和高效的靶向递送载体,逐渐克服了众多挑战。目前,编码肿瘤相关抗原(TAAs)、肿瘤特异性抗原(TSAs)或免疫调节剂的各种癌症疫苗正在进行临床试验。在本文中,我们总结了mRNA的优化以及RNA基表达载体在癌症疫苗中的...

...棘孢木霉天冬氨酸蛋白酶基因的克隆表达及其对大豆分离蛋白的水解

韶关学院英东生物与农业学院的周迪,邱小娴,柯野*等人从棘孢木霉中克隆天冬氨酸蛋白酶基因asp,并在毕赤酵母(Pichiapastoris)中表达(www.e993.com)2024年11月29日。对表达的重组蛋白酶rAsp成熟肽序列和同源建模分析,然后采用rAsp浓缩液水解大豆分离蛋白,研究rAsp对大豆分离蛋白的水解及降低大豆蛋白致敏性的效果,旨在为酸性蛋白酶应用于大豆蛋白加工或...

显著抑制癌细胞增殖和转移,西南医科大学:发现肝癌治疗新靶点

与对照组相比,过表达circACVR2A可显著增强肝癌细胞Huh-7和Hep3B的细胞活力,而敲低circACVR2A会导致Huh-7和Hep3B细胞活力显著下降。在细胞克隆形成实验中,研究人员发现过表达circACVR2A增加了细胞克隆的数量,而沉默circACVR2A则减少了细胞克隆的数量,这表明circACVR2A在体外可以促进Huh-7和Hep3B细胞的肿瘤发生。

国自然撰写:经典分子机制研究(一)|位点|质粒|扩增|dna|rna|聚合酶...

2.2.1构建转录因子A真核表达载体将编码转录因子A的基因序列连入真核表达载体pcDNA3.1(+)后经酶切鉴定,出现了_bp目的条带,结果与前期设计相符,证明在真核表达载体中插入了相应的转录因子A蛋白编码序列,命名为pcDNA3.1-转录因子A。

Nature Methods | 突破蛋白质功能研究瓶颈:ORFtag高效标记与筛查...

通过单独克隆和转染每个筛选出的蛋白,发现所有测试的候选蛋白质,包括先前未知的调控因子,都能够在招募实验中验证其功能。例如:Pxn和1700102P08Rik蛋白质的招募足以强烈激活转录。Trim8和Msantd3的招募则足以抑制转录。Maco1和Trim13在招募到mRNA的3'UTR时能够抑制报告基因表达。

革新CGT领域细胞制备生产方式,「深研生物」完成超3亿元B+轮融资|...

“质粒+转染试剂”的生产方法,采用“稳转细胞系+无血清悬浮”的生产工艺,无需使用质粒,也不再需要专门搭建生产质粒的GMP厂房和设备,简化慢病毒载体生产流程的同时,也减少了相关质控和运营成本;此外,由于使用单克隆细胞株进行生产克服了瞬时转染的缺点,也提高了慢病载体的均一性和表达量,利于批间差的控制,生产工艺...