怎样的研究一直被诺奖青睐?|蛋白|细胞|受体|内源性|gpcr_网易订阅

起初,这项工作非常艰难,使用cDNA(反转录DNA)文库反复尝试克隆仍然无法获得正确的结果。但是,科比尔卡提出了一个大胆的想法,尝试使用基因组文库来完成克隆任务。就是在这一年,莱夫科维茨实验室开创了一个里程碑,成功克隆并测序分析了编码仓鼠β2-肾上腺素能受体蛋白(β2AR)的基因。经过对该基因序列的深入研究,他们惊...

怎样的研究一直被诺奖青睐?—新闻—科学网

起初,这项工作非常艰难,使用cDNA(反转录DNA)文库反复尝试克隆仍然无法获得正确的结果。但是,科比尔卡提出了一个大胆的想法,尝试使用基因组文库来完成克隆任务。就是在这一年,莱夫科维茨实验室开创了一个里程碑,成功克隆并测序分析了编码仓鼠β2-肾上腺素能受体蛋白(β2AR)的基因。经过对该基因序列的深入研究,他们惊...

通过探究豇豆轻斑驳病毒,研究其基因组结构及其编码,有何特征?

,可以更深入研究核酸与蛋白的互作以及三种不同蛋白质间的互作,为人类的科学研究进展做出贡献。酵母转录因子GAL4是由C端转录激活结构域和N端DNA结合功能域组成,AD和BD在结构与功能上相互独立。AD经转录机制结合启动下游基因转录,BD则是通过始别转录因子上游激活序列后激活,AD和BD只有在空间上结合在一起,转录因子...

Nature重磅综述 |关于RNA-seq,你想知道的都在这

同样使用模板置换逆转录来制备全长cDNA,在加接头制备测序文库之前,可以自己决定是否进行PCR扩增。DirectcDNA测序可消除PCR偏差,获得的测序结果质量更高;PCR扩增的cDNA文库的测序产出(测序获得的reads数)更高,适用于样本中RNA含量较少的情况。而目前还未在ONTcDNA测序中发现PacBio测序存在的转录本长短选择偏好。这些...

棉花抗黄萎病研究取得重大进展

中国科学院遗传与发育生物学研究所副研究员王义琴通过用蛋白提纯、测序和cdna文库筛选等方法从天麻中克隆到一个天麻抗真菌蛋白基因,命名为gafp,并证明gafp对包括黄萎病在内的多种真菌具有较好抗性,进一步筛选天麻基因组文库发现,天麻中存在着4个gafp基因。通过对4个成员的活性比较研究发现,一个新的成员gafp4在体内和体...

Nature Methods | 全面评估长读长RNA测序:揭示转录组分析新前沿

研究还发现,文库制备和测序平台的差异显著影响了转录组定义(www.e993.com)2024年11月16日。例如,文库制备方法如CapTrap和cDNA测序生成了更多的读长数据,但不同工具对这些数据的处理结果不同。在具体实验中,不同平台生成的读长数量存在显著差异,这表明在选择测序平台时需要综合考虑文库质量和读长数量。

气死!一周的载体构建,我却做了两个月,问题出在哪

目的基因在扩增模板中表达量低:选择目的基因表达量较高的组织或细胞cDNA为模板;从头合成目的基因片段。引物设计不特异,退火问题不当等:优化PCR反应体系;设置梯度降温程序。2.测序文库制备失败基因组DNA提取不当,质量不高;cDNA合成时,样本起始量低;所用试剂效率低。

NGS文库构建的关键酶!

文库构建的本质是将片段化后的基因组DNA两端加上通用接头序列,通过PCR扩增获取足够多能够上机测序的文库核酸分子。根据样本类型,又分为DNA建库和RNA建库。在DNA文库构建过程中,TA克隆连接接头建库是目前商业技术中最常用的技术手段,主要建库流程如下:图2.Illumina平台DNA文库构建流程...

新冠病毒RNA会整合到人类基因组中吗?

在它的生命周期中不存在核相(基因的剪接和整合发生在核相),它的整个繁殖周期均在胞浆,意味着与发生在细胞核的剪切和整合不可能处于细胞的同一区位,因此,从生物学角度不可能有整合。综上可知,新冠病毒感染细胞后其核酸不会整合到人体基因组上,在更为严谨的检测中发现,之前观察到的整合现象是由于使用的检测方法引入...

国家淡水水产种质资源库和海洋水产种质资源库开建

平台自2011年建设完成以来,主要以活体资源、标本资源、精子及胚胎资源、基因资源和细胞资源等为主要形式对水产种质资源进行保存和共享,截至目前,共收集整理共享2028种活体资源信息、6543种标本种质资源信息以及28种基因组文库、32种cDNA文库和42种功能基因等DNA资源信息,活体整合数量占全国保存数量的95%以上,重要养殖生物...