知识分享|一文了解实时荧光定量PCR(qPCR)技术的原理与分类

目前,根据所用荧光物质的化学原理和PCR检测的特异性,可将qPCR其分为两大类:第一类:DNA染料法荧光染料可以快速渗入DNA双链与之结合,发射荧光信号,而不掺入双链的荧光染料分子不会发射任何荧光信号,可以对特异性和非特异性的PCR扩增产物进行检测,例如SYBRGreenI和EvaGreen。DNA染料法第二类:荧光探针法...

PCR技术检测病毒原理及优势解析

1)病原体检测:PCR技术可以直接检测病毒核酸,对于病毒性疾病的早期诊断具有重要意义。例如,在新冠病毒疫情期间,PCR技术成为快速诊断新冠病毒感染的主要手段之一。(2)病毒载量监测:PCR技术可以定量检测病毒核酸的含量,从而评估病毒的复制活性和感染程度。这对于判断疾病的严重程度、预测病情发展趋势以及评估治疗效果具有重要...

PCR or 胶体金?甲、乙流检测一致性大比拼

胶体金免疫层析(简称胶体金法)是检测流感的一种常用方法,它操作简单,出结果快,但在准确性和特异性方面不太理想,有时会导致漏诊或误诊。随着科技的发展,我们有了更先进的病毒检测方法,如聚合酶链反应(PCR)技术、质谱技术和测序技术等。本研究计划同时使用胶体金法和实时荧光定量PCR(qPCR)法来检测疑似流感患者的样...

PCR反应的几大要素(各组分和条件)

四种dNTP(dATP、dCTP、dGTP和dTTP)是PCR原料,其比例和浓度与PCR密切相关。dNTP粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应用1MNaOH或1MTris配成高浓度后,HCI的缓冲液将其pH调节到7.0～7.5,小量分装,-20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中,dNTP应为50～200μmol/L,...

上海可直接备案的核酸检测类项目达122项,新增甲基化!(附清单)

1.结果呈现阳性时表示存在CT相关病原体核酸,在排除以下几种因素后可确诊为CT感染:①在CT的诸多检测手段中,PCR方法所检测靶物质为核酸,不受标本生物活性的限制,对于已经死亡的病原体仍可检测出来,即感染后药物治疗有效的情况下,患处仍会有少量已死亡的病原体存在。应在停药2周后进行检测,若在用药期间进行病情的...

2023PCR标准大盘点|这些行业新标准你知道吗?

在评价方法中对整机性能进行评价时需要具备DNA标准物质和荧光定量PCR检测试剂,其中,DNA标准物质是国家有证标准物质,包括线性标物和样本标物,且线性标物应为10倍浓度梯度的DNA标准物质系列溶液;荧光定量PCR检测试剂中的TaqDNA聚合酶需要符合GB/T35542的要求,引物探针需要符合GB/T34797的要求(www.e993.com)2024年11月14日。

常用PCR技术及原理

数字PCR(DigitalPCR,dPCR)是一种核酸分子绝对定量技术。当前核酸分子的定量有三种方法,光度法基于核酸分子的吸光度来定量;实时荧光定量PCR(RealTimePCR)基于Ct值,Ct值就是指可以检测到荧光值对应的循环数;数字PCR是最新的定量技术,基于单分子PCR方法来进行计数的核酸定量,是一种绝对定量的方法。主要采用当前分析...

一文读懂:PCR,qPCR,Real-time PCR,RT-PCR和RT-qPCR

数字PCR(DigitalPCR,Dig-PCR,dPCR)即第三代PCR技术,是对原始PCR的另一种改进,是一种能够实现核酸绝对定量的精准检测技术。基于泊松分布原理,数字PCR技术核酸样品分配到大量独立、平行的微反应单元中,使每个反应室中平均只有一个拷贝或者没有目标DNA分子,然后加入荧光信号进行扩增,从而实现靶标核酸分子的绝对计数,...

追问weekly | 过去一周,脑科学领域有哪些新发现?

AI驱动智能PCR系统大幅提升DNA检测效率新型数据增强算法RoVi-Aug助力跨机器人技能迁移WorldScribe:实现盲人实时环境理解的新一代辅助工具*如需定位对应内容,请使用微信的检索功能(点击右上方三点,找到查找页面内容按钮)神经科学模块化大脑回路揭示果蝇交配识别系统的进化机制...

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