Western Blotting--蛋白浓度测定

Bradford法(考马斯亮蓝法)是在酸性条件下,加入考马斯亮蓝G250与蛋白质(主要是碱性或芳香族氨基酸)结合为蓝色化合物,吸光度值从465nm变成595nm,最后测定595nm的OD值来计算蛋白质浓度,Bradford法会受到高浓度去垢剂的干扰。双缩脲法或Folin法由于检测灵敏度不够高,已被BCA法或Bradfor...

WB如何快速蛋白定量(Bradford 法)

Bradford法实验原理:考马斯亮蓝G250,在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质—色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保...

蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE,polyacrylamide gel...

电泳后蛋白质染色目前常用的是考马斯亮蓝法,其比氨基黑染色法灵敏度高,可以进行定量扫描,比银染法简便。本次实验是利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法来分离各种血清蛋白。血清中含有前清蛋白、清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白和各种脂蛋白等。各种蛋白质由于分子量、等电点及形状不同,在电场中的泳动速度不...

微型光纤光谱仪可以应用于哪些领域?

譬如,Bradford法测蛋白质,这是基于让染料分子(考马斯亮蓝G250)与蛋白质结合成复合体,该复合体在595nm有最大吸收峰,这种方法的好处是待测蛋白质样品中可能含有的K+,Na+,Mg2+,(NH4)2SO4,乙醇等杂质不会干扰蛋白质测定。BCA法则是利用蛋白质的化学性质,即在碱性条件下蛋白质可以与Cu2+发生络合反应,并将Cu2+...

华理刘昌胜院士/屈雪教授AS:电分选策略构建组成/微结构双梯度...

(a)将模型蛋白牛血清白蛋白(BSA)加载到Janus膜的多孔层中并测量其方向依赖性释放的图示。(b)BSA释放到扩散池两个隔室中的图像;i)JanusChit/Gelatin膜;ii)通过流延和冷冻干燥制备的多孔Chit/Gelatin对照膜;iii)通过流延制备的致密Chit/Gelatin对照膜(注:将考马斯亮蓝G250添加到两个室中的溶液...