村民猎杀斑羚剥皮肢解掩耳目 DNA实验“断案”
实验方法:酚氯仿经典法DNA抽提实验单位:四川农业大学生命科学学院实验室实验目的:确定被肢解的动物种类去年12月的一天,阳光拨开密林照到山间小溪,两名男子蹲坐四川省绵竹市金花镇三江村一处山沟,将猎捕来的两只野生动物剥皮、肢解。两人以为,这样一来,只要咬定这是两只普通的山羊,就能掩人耳目。他们没想到的是,...
拍击式无菌均质器提取DNA的实验操作案例分享
4.破碎细胞:将混合液移入拍击式无菌均质器的样品杯中,设置好相应的参数(如拍击次数、拍击间隔等),启动设备进行细胞破碎。5.提取DNA:破碎完成后,将破碎液转移至离心管中,加入适量的酚氯仿-异戊醇进行有机抽提,再加入氯仿-异戊醇进行第二次抽提。6.DNA沉淀:将上清液转移至新的离心管中,加入适量的无水乙醇沉...
实验帖-DNA提取那点事儿~~
作为表面变性的酚与氯仿,在去除蛋白质的作用中,各有利弊,酚的变性作用大,但酚与水相有一定程度的互溶,大约10%~15%的水溶解在酚相中,因而损失了这部分水相中的DNA,而氯仿的变性作用不如酚效果好,但氯仿与水互不相溶,不会带走DNA。所以在抽提过程中,混合使用酚与氯仿效果最好。经酚第一次抽提后的水相中有残...
谁是凶手,DNA在说话——法医实验室DNA鉴定的那些事儿
酚-氯仿法提取dna最能说明这一点,其通常用于提取血液里的dna。将离心机温度设置为4°c(或39.2°f)可以有效去除蛋白质和其他杂质,并保持dna带谱的完整性。与之相比,非冷冻台式高速离心机在离心过程中可能造成dna断裂,同时,离心时转子高速旋转产生的热量也可能降解dna样品。性能优异的实验室设备可以帮助法医调查员...
植物基因组DNA的提取实验原理和实验步骤
一、实验目的掌握植物总DNA的抽提方法和基本原理。学习根据不同的植物和实验要求设计和改良植物总DNA抽提方法。二、实验原理通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需加入抗氧化...
细菌DNA的提取方法
4.加入100ul5mol/LNaCl,充分混匀,再加入80ulCTAB/NaCl溶液,混匀后再65℃温育10min(www.e993.com)2024年9月30日。5.加入等体积的酚/氯仿/异戊醇混匀,离心4-5min,将上清转入一只新管中,加入0.6-0.8倍体积的异丙醇,轻轻混合直到DNA沉淀下来,沉淀可稍加离心。上海创赛提供异丙醇,99.5%,超干,含分子筛,水≤50ppm,67-63-0...
DNA实验“断案”:村民偷猎斑羚
实验方法:酚氯仿经典法DNA抽提实验单位:四川农业大学生命科学学院实验室实验目的:确定被肢解的动物种类去年12月的一天,阳光拨开密林照到山间小溪,两名男子蹲坐四川省绵竹市金花镇三江村一处山沟,将猎捕来的两只野生动物剥皮、肢解。两人以为,这样一来,只要咬定这是两只普通的山羊,就能掩人耳目。他们没想到的是,...
上新| CUT&Tag、CUT&RUN双来袭,让你更快hold住蛋白质与DNA互作!
针对低起始量的293细胞(10、25、50、100cells),使用TD904以H3K4me3为目的蛋白进行CUT&Tag实验,通过Agilent2100Bioanalyzer进行文库分布检测。结果显示,对于低细胞投入量,TD904均可构建出相似的ladder状的文库,说明TD904能够兼容低细胞起始量的实验;同时,pA/G-Tnp和DNA提取磁珠的联合升级,使靶向切割更加精准,重复...
RNA的提取与提纯
DNA的主要功能是记录遗传信息,而RNA主要功能是转录和翻译DNA的遗传信息,其实RNA还有其他的一些功能,比如RNA是很多病毒的遗传信息,RNA也具有一定的催化作用。本人最近在做RNA相关实验,因此需要用到RNA的提取和纯化,今天就和大家分享一下我用到的RNA提取和纯化的方法和心得,如果大家有更好的意见,也欢迎指正。
科研| mSphere:多菌种肠道微生物群落中病原菌与共生菌个体间相互...
然后用新鲜的SAB1稀释这些培养物,使混合培养物中每种物种在600nm(OD600)处的最终浓度达到0.1光密度,测定微生物的生物膜。在DNA提取之前,将单氮化钠(PMA;生物氚)添加到40mM最终浓度的再悬浮样品中,在黑暗中孵化10分钟(在厌氧柜中培养37°C),随后基于苯酚氯仿的方法进行了DNA的萃取,采用实时定量的PCR(qPCR)测定...