中科院动物所金坚石组综述16S rRNA基因扩增子测序技术的前世今生
以下是大多数已发明的16SrRNA基因扩增子测序方法的标准流程:通过一对靶向16SrRNA基因保守区域的通用引物扩增菌群中细菌的16SrRNA基因,并利用高通量测序平台测序获得所有扩增的16SrRNA基因的序列。高通量的16SrRNA基因扩增子测序方法有以下优点:该方法基于16SrRNA基因的扩增,因此可以适用于未培养的细菌或低生物...
东北农业大学张微副研究员等:CRISPR/Cas-等温扩增技术
其扩增过程需要4条特异引物,首先,内部引物结合靶标物质,在BstDNA聚合酶的作用下延伸成双链,聚合酶延伸外引物以置换新合成的链,由于F1c和F1区域的杂交,使得位移链在5′端形成茎环结构,在3′端以类似的方式扩增,形成两端具有茎环结构的DNA,靶DNA的重复序列通过连续的延伸和置换进行扩增。由于LAMP技术使用4~6个...
...授权:“一种乙肝病毒基因耐药突变位点的单管巢氏PCR扩增引物...
本发明针对乙肝病毒RT基因上的核苷(酸)类药物突变位点,获得了用于检测所述耐药突变位点的单管巢氏PCR扩增引物,具有特异性好、灵敏度高、重复性好等优点,对HBVDNA载量的检测限为25IU/mL,可以满足临床检测乙肝病毒基因耐药突变的需要。在所述引物的基础上,本发明还获得了扩增乙肝病毒基因耐药突变位点的试剂盒。利用...
从此再也不用自己设计qPCR引物了,包括66种植物3331426个基因引物...
虽然,qPCR引物可以人工设计,但该过程非常耗时,且很难保证引物的特异性、扩增效率一致性。该研究团队设计了基于热动力学的基因特异qPCR引物设计流程,并对人、小鼠、家蚕、斑马鱼、线虫、酵母、拟南芥、水稻、玉米和油菜等共147个已完成全基因组测序物种的全基因组qPCR引物设计和验证分析,这147个物种包含80种动物(37种哺...
非洲猪瘟实验室PCR检测仪:结合快速采光模式
扩增:收集疑似样品(如猪血、淋巴组织等)中的ASFVDNA,利用PCR技术进行扩增。模板制备:提取和纯化样品中的ASFVDNA,制备成PCR反应的模板。PCR反应体系:将制备好的ASFVDNA模板与PCR反应体系中的试剂和引物混合,进入PCR反应管。热循环:PCR仪器根据特定的温度程序进行热循环,包括变性、引物结合和延伸三个步骤,反复...
探讨如何选择适合的热启动Taq酶|扩增|活性|pcr|dna|特异性|taq酶...
传统PCR中,反应体系的各组分(Taq酶、dNTP、引物等)会一并加入并进入循环,在反应温度由室温升高至94~95℃过程中,引物在低温下就会结合到非特异性序列上,导致DNA模板被非特异性扩增(www.e993.com)2024年10月23日。热启动PCR技术的出现很好的解决了这个问题。将Taq酶的加入时间推迟到第一个循环的退火步骤。因为只有在90℃以上的初始变性步骤之后...
...可以解决碱基低频突变快速检测中存在的非特异性条带干扰和引物...
专利摘要显示,本发明公开了一种高特异性的碱基突变PCR检测方法,包括:首先对模板DNA进行巢式PCR富集;然后使用无3’??5’外切酶活性且有焦磷酸解活性的DNA聚合酶,在焦磷酸盐存在的环境下,使用修饰引物进行PCR扩增,修饰引物在模板上对应的位置位于巢式PCR引物的内侧,其3’末端是双脱氧核苷酸,与待检测突变型模板互补而...
Nature重磅综述 |关于RNA-seq,你想知道的都在这
采用Illumina的short-read测序做DGE分析的核心步骤包括RNA提取,cDNA合成,接头连接,PCR扩增,测序和数据分析(图一)。由于mRNA片段化和基于beads的文库纯化过程中偏好150-200bp的片段,导致这个方案最后获得的cDNA片段都在200bp以下。每个样本平均测20-30millionreads,对每个基因或转录本进行定量,再统计分析差异基因(...
Adv Mater | 高灵敏度、高特异性的新型DNA等温扩增方法:AMPLON
AMPLON反应是一种基于DNA引物精确工程设计和协调的高度特异性和快速靶标扩增技术。该反应从LP(具有多臂PEG)与靶序列结合开始,通过反义L1DNA臂启动扩增,与正义L2DNA臂(通过PEG连接到反义臂)进行自启动,产生茎环PEG-DNA杂交结构。其他具有DNA的游离PEG臂启动AMPLON循环步骤,指导多臂扩增子的形成,最终用作AMPLON延伸步...
无论你是“E人”或是“I人”,今天我们都是“P人”
3、特殊RNA的转录水平检测:根据特殊RNA的结构,如microRNA、circRNA等,设计其特殊引物,如茎环结构引物、反向引物等,对这类RNA的转录水平进行定性、定量分析。RT—PCRRT—PCR(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction)是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。整个反应过程分为两步,第...