反相高效液相色谱RP-HPLC检测蛋白质杂质
反相高效液相色谱RP-HPLC由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,基于溶质在固定相和流动相之间的相互作用,是液相色谱的主要的分离模式,非极性固定相与溶质的非极性部分相互作用,而极性流动相则与溶质的极性部分相互作用,几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。检测步骤通常包括样品准备、...
色谱法详解
色谱柱的特性(如基材的物理和化学性质、用于制备固定相的表面修饰程序、极性等)也对保留行为产生重大影响。可区分两种操作模式:反相液相色谱(RPLC)和正相LC。对于正相LC,流动相的极性小于固定相;反相LC则相反。开发LC方法时,色谱柱选择至关重要。大多数分离在反相模式下使用C18(十八烷基硅烷,ODS)柱进行。通常,色谱...
21条黄金圣律:让你更懂液相流动相
流动相是影响液相色谱的关键因素。一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。高效液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、有机溶剂或它们的混合液,但是如何配制。选择配制的方法不同,分析结果特别是保留时间,是会有显著差别的。高效液相色谱法中的流动相主要用水性溶...
血清(浆)类固醇激素液相色谱-串联质谱检测质量保证专家共识发布
1.HPLC分离:HPLC是一种基于待测物在固定相和流动相中具有不同分配系数的分离技术。通常使用对非极性分子具有高亲和力的非极性固定相(如18C、五氟苯基等)色谱柱分离类固醇激素[20],通过流动相极性变化将吸附于色谱柱上的类固醇激素重新溶于流动相,从而实现逐步洗脱分离。通过开发精密的流动相梯度洗脱程序和使...
高效液相色谱中溶剂效应理论
样品进入高效液相色谱中,当溶剂与流动相存在差异时,一部分样品溶解进入了流动相,一部分还留在溶剂里,造成色谱保留的差异。造成这种差异的原因主要有以下几个方面:(1)溶剂强度在反相色谱系统中溶剂强度的顺序为水(最弱)<甲醇<乙腈<乙醇<四氢呋喃<丙醇<二氯甲烷(最强)。溶解样品的溶剂强度大于该样品出峰时流动相...
【应用】使用步琦中压制备色谱C-815高效分离纯化ω-3脂肪酸
C18和AQ-C18都是非极性反相色谱固定相,带有十八烷基碳链的硅胶(www.e993.com)2024年10月20日。然而,AQ-C18经历硅羟基的极性末端封口,减少了表面的残留硅醇,从而增强了ω-3脂肪酸乙酯的分离效果(见??图2)。因此,AQ-C18被选为后续实验的固定相。▲??图2.RP-MPLC固定相(A)C18和(B)AQ-C18的结构差异3流动相对...
分子光谱法详细解析
可区分两种操作模式:反相液相色谱(RPLC)和正相LC。对于正相LC,流动相的极性小于固定相;反相LC则相反。开发LC方法时,色谱柱选择至关重要。大多数分离在反相模式下使用C18(十八烷基硅烷,ODS)柱进行。通常,色谱检测结果与分析物水平成比例,尽管还存在其他形式的检测。常见的检测器包括紫外/可见吸收(UV/vis)、荧光(...
中药物质基础的化学解析丨Engineering
该模式由酸性条件流动相(1D)与带正电荷的RP色谱柱(AcchromXChargeC18)和碱性流动相(2D)与常规反相色谱柱(EVOC18)组成。利用此模式,首次系统解析了《中国药典》(2015版)中收录的钩藤(钩藤属)5种植物来源的吲哚类生物碱。离线2DLC系统的正交性为74%。有效地显示和表征了钩藤5种植物来源的1227种吲哚类生物...
【瑞士步琦】使用SFC分离手性反式-1,2-二苯乙烯氧化物
超临界流体色谱法(SFC)在手性分子的分离纯化中,具有其他分离技术无法比拟的优点。SFC使用超临界二氧化碳作为流动相,这是一种清洁和绿色的溶剂,很容易从最终产品中去除。此外,SFC提供了高分辨率和快速的分离。预测哪种固定相能够有效分离SFC中特定的一组对映异构体,即使在现在看来也是十分困难,这使得我们需要选择...
“生物碱的检测液相色谱-质谱法”国家标准发布 填补技术领域空白
——高效液相色谱法又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行...